| 1. 难度：中等 | |
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某科研团队利用植物细胞工程技术，把基因序列已知的抗除草剂(Bar)基因导入原生质体获得抗除草剂大豆。请回答下列相关问题：
(1)对于已获得的Bar基因可以用______________技术进行扩增。图中的a过程通常使用相同的____________酶和DNA连接酶，使目的基因与载体连接形成重组DNA。 (2)在b过程中，获得原生质体除了需要纤维素酶和果胶酶，还需要用到的试剂是__________________________。 (3)成功导入重组DNA的原生质体经脱分化形成I__________，进而生长发育成植株。下列不属于I细胞应具有的特征是__________。 A．薄壁细胞 B．细胞质丰富 C．液泡小 D．细胞核小 (4)若要判断转基因抗除草剂大豆是否成功，比较简便的检测方法是_____________________。
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| 2. 难度：中等 | |||||||||||
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下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题：
(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用________两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过________酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入处于________态的大肠杆菌。 (2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加________，平板上长出的菌落，常用PCR鉴定，所用的引物组成为图2中______________。 (3)若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为_______，对于该部位，这两种酶________(填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切开。 (4)若用Sau3AⅠ切图1质粒最多可能获得________种大小不同的DNA片段。
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| 3. 难度：中等 | |
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生物工程技术为人们获得需要的生物新品种或新产品提供了便利。请回答： 人的生长激素基因 抗虫基因―→重组Ti质粒―→细菌M (1)在培养转入生长激素基因牛的过程中，①过程需要的工具酶是________________________。②过程中，应对代孕母进行______________处理，以便早期胚胎着床。若在②过程中培养到早期胚胎阶段采用____________技术，可培育出多头相同的转基因牛。 (2)在抗虫棉培育过程中，重组Ti质粒先导入细菌M，细菌M的名称是____________，③过程中的棉花细胞常采用愈伤组织细胞而不采用叶肉细胞，原因是愈伤组织细胞__________，④过程中，愈伤组织细胞可通过____________技术培养成单个胚性细胞，胚性细胞再分化形成的胚状体可发育成植株。
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| 4. 难度：中等 | |
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如图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图回答：
(1)能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？__________，为什么？____________________________________________________________________。 (2)过程②必需的酶是____________酶，过程③必需的酶是______________酶。 (3)若A中共有a个碱基对，其中鸟嘌呤有b个，则③④⑤过程连续进行4次，至少需要提供胸腺嘧啶____________个。 (4)在利用AB获得C的过程中，必须用____________________切割A和B，使它们产生________________，再加入______________，才可形成C。 (5)为使过程⑧更易进行，可用______________(药剂)处理D。
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| 5. 难度：中等 | |
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青蒿素是治疗疟疾的重要药物。如图为利用二倍体野生型青蒿，通过现代生物技术培育青蒿素含量高的四倍体细胞和植株的示意图。请回答下列相关问题：
(1)上述a→d过程涉及的原理有____________________________(至少两项)。其中a为______过程，b过程需要在________________作用下完成，d过程的技术基础是____________。 (2)通过e过程可以实现工业化生产青蒿素，有关叙述正确的是________。 A．该过程需要适量激素以刺激分化 B．该过程不需要提供有机营养物质 C．该过程需要诱导相关基因的表达 D．该过程的原理是染色体畸变 (3)已知青蒿素的合成受G基因控制，利用________________酶可将G基因从青蒿细胞中分离出，并经改造和扩增后，将其与含有抗生素抗性基因的质粒形成重组DNA，再与经____________处理的大肠杆菌液混合，使重组DNA更易进入大肠杆菌，通过培养大肠杆菌可生产青蒿素。 (4)下列有关基因工程的叙述错误的是________。 A．获取目的基因需要酶的催化 B．目的基因能够在宿主细胞中复制 C．大肠杆菌是基因工程的常用载体 D．能够实现定向改造生物性状
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| 6. 难度：中等 | |
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下图表示利用生物技术获得转基因猪和转基因烟草的过程(图中数字表示过程或技术，字母表示物质或结构)。请回答下列问题：
(1)为分离、提纯苏云金芽孢杆菌，先用________培养基进行扩大培养，再用________法进行分离，获得一个个单独的________________。 (2)研究过程中，采用________技术对目的基因进行扩增，然后将目的基因与质粒等载体结合形成了重组质粒。在重组质粒的构建过程中需要的工具酶有___________________________________。 (3)图中②代表________技术。培养C中的ES细胞时，一般要在培养皿底部制备一层胚胎成纤维细胞，目的是________________________________________________________________。 (4)若在0.5～0.6 mol/L的________溶液中用特定的酶处理D，可获得原生质体。若将含有D的培养物放在摇床上，通过______________培养可以分散成单细胞，这些单细胞具有________细胞的特征。 (5)使用自然生长的烟草茎进行组织培养，需要依次在70%酒精和________溶液中浸泡消毒。各种器皿和培养基等通常用________________法灭菌。 (6)从经特定免疫处理的猪中提取B淋巴细胞，与______________________________________ 融合，形成杂交细胞，经筛选、克隆化培养后，获得的单一细胞特征是_____________________。
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| 7. 难度：中等 | |
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下图表示试管山羊的培育流程图。
请据图回答： (1)胚胎工程的研究对象是__________动物，试管山羊的培育过程中涉及的胚胎工程技术有：______________________________。 (2)甲过程为了获取更多的卵母细胞需要对卵巢进行____________________处理，获取的卵母细胞经培养成熟后可与______________在体外合适的环境下共同培养一段时间完成受精作用。 (3)下列关于丙过程的叙述正确的是________。 A．该过程为细胞培养，目的是获取更多的受精卵 B．该过程为胚胎体外培养，目的是让胚胎具有着床能力 C．该过程中所用的培养液成分往往是相同的 D．通过对培养液的改进目前也可将部分动物直接培养成试管动物 (4)为了快速繁殖该山羊，还可在丁过程前对早期胚胎进行________，经培养后再分别移植到____________的母羊的相应部位。 (5)为了获得在乳汁中含有复合单克隆抗体的转基因母羊，则目的基因的受体细胞是________。 A．效应B细胞 C．受精卵
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| 8. 难度：中等 | |
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世界上首例转基因动物是转大鼠生长激素基因的小鼠(将大鼠生长素基因导入小鼠体内，大鼠与小鼠是不同的物种)，其生产过程如图：
(1)通过基因工程生产转基因小鼠，其核心是__________________，所需工具除了载体、限制性核酸内切酶外，还需要________。 A．DNA聚合酶 B．DNA连接酶 C．RNA聚合酶 D．解旋酶 (2)据图分析，1的受体2为________细胞；该转基因小鼠的性别取决于______(填“甲”或“乙”)。若要检测该转基因小鼠中目的基因是否成功表达，则可以从小鼠的________中提取生长激素，进行特异性检测。 (3)该实验涉及胚胎移植、______________等胚胎工程技术。胚胎移植前，需要对丙的处理是________________________________________________________________________。 若要获得多只和丙具有相同遗传物质的小鼠，可以对早期胚胎进行__________处理。 A．胚胎干细胞核移植 B．胚胎分割 C．胚胎细胞克隆 D．胚胎细胞诱变
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