Question

耐高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了能高效产生耐高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示：

(1)从用途上来说，Ⅰ号培养基属于________培养基，仅以淀粉作为________源；从物理状态上来说，Ⅱ号培养基属于固体培养基，配制时一般加入________作为凝固剂。

(2)进行①过程的目的是________；②过程所使用的接种方法是________法。

(3)Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是________________；一般对配制的培养基采用________________法灭菌。

(4)部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放淀粉酶分解培养基中的淀粉，在菌落周围形成透明圈，应挑出透明圈________(填“大”或“小”)的菌落，接种到Ⅱ号培养基上。

(5)下图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请分析接种的具体方法。

获得图A效果的接种方法是________，获得图B效果的接种方法是________。一同学用涂布平板法纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是__________，应当怎样操作才可避免此现象？_______________________。

Answer

选择 (唯一)碳 琼脂 稀释 涂布平板 先调节pH，后灭菌 高压蒸汽灭菌 大 涂布平板法 平板划线法 菌液浓度过高 增大稀释倍数(或培养过程被杂菌污染 严格无菌操作)

【解析】试题分析：本题主要考查特定微生物的培养与分离纯化，主要考查对微生物等知识的识记。为筛选某种特定的微生物，常采用选择培养基对微生物进行初步筛选。要筛选能产生淀粉酶的微生物，就应该将淀粉作为唯一碳源，不能产生淀粉酶的微生物由于不能分解淀粉获得碳元素而死亡；在配制培养基的过程中，应该先调节pH，再灭菌处理。

(1)筛选特定微生物的培养基属于选择培养基。淀粉酶能催化淀粉分解，故筛选能高效产生高温淀粉酶的嗜热菌要以淀粉为唯一碳源。采用平板划线法接种的是固体培养基，通常用琼脂作为凝固剂。

(2)①、②过程为将样品稀释后用涂布平板法接种。

(3)制备培养基时先调pH后灭菌，培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。

(4)嗜热菌可产生淀粉酶以分解培养基中的淀粉，在菌落周围出现透明圈，透明圈越大，说明该嗜热菌分解淀粉的能力越强。

(5)纯化培养中接种方法有平板划线法和涂布平板法，前一种方法形成的菌落分布较均匀，后一种方法形成的菌落分布不均匀，先划线的部分菌落密集甚至相连，后划线的部分菌落分布稀疏。涂布平板时如菌液浓度过高会导致培养基上菌落连成一片，无法分离，操作时应适当增大稀释倍数。