Question

牛羊等反刍动物可以消化秸秆，原因在于其胃部、盲肠等处有丰富的纤维素分解菌。研究人员从牛胃中筛选纤维素分解菌，并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题：

（1）研究人员采用稀释涂布平板法分离、纯化纤维素分解菌。在实验前，需要使用________________法对培养基进行灭菌；在接种前看随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，目的是_____________；在接种的过程中，需要使用________________（填“接种环”或“涂布器”）进行接种。

（2）刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖、葡萄糖发生这种反应。若研究人员在刚果红培养基平板上，发现以某种菌的菌落为中心的__________，则表明此种菌为纤维素分解菌。

（3）研究人员欲将筛选得到的纤维素分解菌进行大量培养，应选用__________培养基（填“液体”或“固体”），并以__________为唯一碳源，配置此培养基时，__________（填“能”或“不能”）使用牛肉膏作为氮源。培养过程中应保持恒温箱中的温度约为__________（填“4℃”“20℃”或“35℃”）。

Answer

高压蒸汽灭菌 检测培养基平板是否无菌 涂布器 透明圈 液体 纤维素 不能 35℃

【解析】【试题分析】

本题考查微生物的培养与分离的相关知识，需要考生具备以下主要基础知识：

1.培养基的灭菌方法、稀释涂布平板接种法。

2.刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中就会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。这样，就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维分解菌。

3.液体培养基可用于微生物的大量培养或工业生产。培养微生物过程中，不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。细菌一般需要在30～37℃的温度下培养。

（1）实验前，需用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌；在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养一段时间的目的是检测培养基平板是否无菌；在用稀释涂布平板法接种过程中，需要实验涂布器进行接种。

（2）因为刚果红可以与纤维素形成红色复合物，且不与纤维素降解产物反应。所以在刚果红培养基平板上，筛选到的有透明圈的就是纤维素被降解的结果，表明此种菌为纤维素分解菌。

（3）液体培养基不仅有利于连续培养以达到最大效益而且可以控制细菌的生长速度，所以欲大量培养纤维素分解菌，应选用液体培养基，并以纤维素为唯一碳源；由于牛肉膏富含碳源、氮源、无机盐等各种微生物成长必需的营养物质，所以不能使用牛肉膏作为氮源；微生物培养时，细菌一般需要在30～37℃的温度下培养1～2d，所以培养纤维素分解菌的过程中，应保持恒温箱中的温度约为35℃。