（2013•丰台区二模）下列有关实验的叙述不正确的是（  ）

A.用于筛选杂交瘤细胞的培养基属于鉴别培养基

B.诱导外植体脱分化需要用含有蔗糖的培养基避光培养

C.平板划线法和稀释涂布平板法均可用于分离纯化菌种

D.用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌实际数目低

（2014•凉山州模拟）微生物需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖，下列与此有关的说法正确的是（  ）

A.以尿素为唯一氮源的培养基上长出的一定是能分解尿素的细菌

B.有的氮源可以作为细菌的能源物质

C.加入酚红试剂的选择培养基，可以筛选能分解尿素的细菌

D.大肠杆菌与硝化细菌所利用的碳源是相同的

（2014•三江县二模）关于细菌的叙述，正确的是（  ）

A.不同种类细菌的生长均需要相同的碳源

B.常用液体培养基分离获得细菌单菌落

C.细菌大量培养过程中，芽孢形成于细菌生长的调整期

D.培养基中含有高浓度NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选

(14分)近十年来，PCR技术(聚合酶链式反应)成为分子生物学实验室里的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如图)，在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。

(1)加热使DNA双链打开，这一步是打开________键，称为________。

(2)当温度降低时，引物与模板________端结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，此过程中原料是________，遵循的原则是________。

(3)PCR技术的必要条件，除了模板、原料、ATP、酶以外，至少还需要三个条件，即：液体环境、适宜的________和________，前者由PCR仪自动调控，后者则靠________来维持。

(12分)在进行DNA亲子鉴定时，需大量的DNA。PCR技术(聚合酶链式反应)可以使样品DNA扩增，获得大量DNA克隆分子。该技术的原理是利用DNA的半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如下图，图中黑色长方形是引物)。在很短的时间内将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。

(1)图中的变性、延伸分别是指________、________。

(2)假设PCR反应中的DNA模板为P，第一轮循环的产物2个子代DNA为N1，第二轮的产物4个子代DNA为N2，N1、N2中分别含有模板DNA单链的DNA分别有____个、____个。若继续循环，该DNA片段共经过30次循环后能形成____个DNA片段。

(3)若下图为第一轮循环产生的产物。请绘出以a链和b链为模板经PCR扩增的产物。

PCR实验中使用的微量离心管、缓冲溶液以及蒸馏水使用前必须进行的关键步骤是(  )。

A．反复洗涤                B．用酒精擦洗

C．高压灭菌               D．在－20 ℃储存

PCR仪实质上是一台自动调控温度的仪器，它调控不同温度的目的是 (  )。

①95 ℃，使DNA分子变性，失去生物活性 ②95 ℃，使DNA分子变性，解开螺旋 ③55 ℃，使DNA分子开始复制、延伸 ④55 ℃，使DNA分子恢复双螺旋结构，恢复活性 ⑤72 ℃，使DNA分子开始复制、延伸 ⑥72 ℃，使DNA分子恢复双螺旋结构，恢复活性

A．①③⑤                B．②③⑤

C．②④⑤                D．②④⑥

PCR一般要经过三十多次循环，从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链作模板时(  )。

A．仍与引物Ⅰ结合进行DNA子链的延伸

B．与引物Ⅱ结合进行DNA子链的延伸

C．同时与引物Ⅰ和引物Ⅱ结合进行子链的延伸

D．无需与引物结合，在酶的作用下从头合成子链

引物的作用是(  )。

A．打开DNA双链

B．催化合成DNA子链

C．使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始复制

D．提供模板

下列有关PCR反应的叙述正确的是(  )。

A．PCR反应所需要的引物只是RNA

B．PCR反应所需要的材料是核糖核苷酸

C．PCR反应所需要的酶在60 ℃会变性

D．PCR反应需要在一定的缓冲溶液中进行