Question

利用微生物分解淀粉生产糖浆具广阔的应用前景。某同学为了从长期种植马铃薯的土壤中分离出能够高效分解淀粉的细菌，进行了如下实验。

（1）实验步骤：

①配制以_____________ 为碳源的固体培养基，为了使培养基凝固成固体，应该向培养基中加入的物质是 _____________ 。

②将土壤样品接种到已灭菌的培养基上，在恒温培养箱中培养一段时间后，培养基上出现 _____________ 。

③将接种针用 _____________  法灭菌后，从②中的培养基上挑取一定量细菌，接种入_____________（固体、半固体、液体）培养基，在恒温摇床上培养24h，使细菌大量繁殖。

④配制与①相同的培养基，并加入少量碘液，使培养基呈蓝紫色。用 _____________ 法将上一步大量繁殖后的细菌接种到已灭菌的培养基上。

⑤培养一段时间后，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小。周围出现较大__________  现象的菌落即为初选菌落，经进一步分离、纯化后即可达到实验目的。

（2）上述所有倒平板和接种操作，都应在超净台上酒精灯 _____________附近进行。

（3）上述实验步骤中，从用途看，①所用培养基属于培养基，⑤所用培________ 培养基。

Answer

（1）①淀粉 琼脂 ②菌落 ③灼烧灭菌 液体 ④稀释涂布平板法 ⑤透明圈 （2）火焰 （3）选择 鉴别

【解析】（1）实验步骤：①筛选分离出能够高效分解淀粉的细菌需要使用以淀粉为唯一碳源的选择培养基，琼脂常常作为凝固剂制作固体培养基。②将稀释后的土壤样品接种到已灭菌的培养基上，在恒温培养箱中培养一段时间后，培养基上出现许多菌落。③金属的接种工具使用灼烧灭菌法灭菌。淀粉分解菌属于异养需氧型微生物，需要将其接种到液体培养基进行摇床震荡培养。④淀粉分解菌的鉴定需要将其用稀释涂布平板法接种到已灭菌的培养基上。⑤淀粉遇到碘液会变蓝色，在固体平板培养基上，淀粉分解菌能够将淀粉分解而使得以淀粉分解菌菌落为中心的非蓝色的透明圈。出现透明圈的就是淀粉分解菌，经进一步纯化培养可达到实验目的。（2）微生物培养的成功的关键是无菌操作，所以所有倒平板和接种操作，都应在超净台上酒精灯火焰附近进行。（3）从用途分析，①所用培养基属于选择培养基，⑤所用培养基属于鉴别培养基。

【考点定位】微生物的分离和培养,土壤中能分解纤维素的微生物及其应用价值

【名师点睛】解决本题需要一些基本知识：固体培养基用于分离菌种，液体培养基用于微生物的大量繁殖。鉴别培养基是指一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物或反应物发生显色反应的指示剂，从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便的从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。选择培养基是指通过培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。从土壤中分离目的微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。