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饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质,很难被动物吸收利用,还影响对其他...

饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质,很难被动物吸收利用,还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶,则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。下图是学生们从作物根部土壤中分离产植酸酶菌株的过程。

(1)分离产植酸酶的菌株,需先配制合适的培养基。配制培养基时,在各成分都溶化后和倒平板前,要进行的是_______、分装和灭菌。对培养基进行灭菌的常用方法是_______。倒平板时,一般需冷却至50 ℃左右,在酒精灯火焰附近操作。依物理性质看,该培养基属于_______培养基。依功能看,该培养基属于_______培养基。

(2)接种以前进行的一系列稀释操作,目的是在培养基表面形成____________,这种接种方法是_______。根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的菌落数就能大致推测出样品中的活菌数。如果图示过程接种的培养基上平均有40个菌落,则1 g土壤中大致的活菌数量是_______个。该方法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目_______

(3)由于植酸钙的不溶解性,可使培养基形成白色浑浊。产植酸酶的菌株会水解植酸钙,菌落的周围将形成透明的区域,根据透明区域的有无,可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示A~E五种菌株中,_______是产植酸酶的理想菌株。

 

调pH 高压蒸汽灭菌 固体 选择 单个菌落 稀释涂布平板法 4×107 少 E 【解析】本题结合图形考查微生物的选择培养,要求考生能根据图中操作判断出图中微生物接种的方法是稀释涂布平板法,能确定样品稀释的倍数并进行相关的计算;能结合题意判断图中的培养基是选择培养基,并能选择出培养基中产植酸酶的理想菌株E;同时熟悉培养基的制备过程。 (1)配制培养基时,在各成分都溶化后和倒平板前,要进行的是调pH、分装和灭菌。培养基灭菌的常用方法是高压蒸汽灭菌。倒平板时,一般需冷却至50 ℃左右,在酒精灯火焰附近操作。依物理性质看,该培养基含有凝固剂琼脂,属于固体培养基。依功能看,该培养基能筛选分离产植酸酶的菌株,故属于选择培养基。 (2)接种以前进行的一系列稀释操作,目的是在培养基表面形成单个菌落,这种接种方法是稀释涂布平板法。图中土壤样品的稀释倍数为105,接种稀释液的体积为0.1mL,如果图示过程接种的培养基上平均有40个菌落,则1 g土壤中大致的活菌数量是(40/0.1)x105=4×107个。该方法统计的菌落数目时,当两个或多个细胞连接在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。 (3)由于植酸钙的不溶解性,可使培养基形成白色浑浊。产植酸酶的菌株会水解植酸钙,菌落的周围将形成透明的区域,根据透明区域的有无,可初步判断该菌是否产植酸酶,且菌株产植酸酶能力越强,培养基中菌落的周围形成的透明区域越大;据此分析实验结果显示A~E五种菌株,可知菌落E周围形成的透明区域最大,因此菌落E是产植酸酶的理想菌株。  
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考点分析:
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下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ表示三种限制酶。请据图回答:

(1)从高表达人乳铁蛋白的组织细胞中提取mRNA,通过_______过程获得cDNA,用于PCR扩增。

(2)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用_______限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌,首先需要在含_______的培养基上进行。

(3)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是_______(填字母代号)。

A.启动子               B.tetR                C.复制原点               D.ampR

(4)过程①可采用的操作方法是_______法。进行过程②之前,需用相应的激素处理代孕牛,使其处于_______状态。

(5)对早期胚胎进行切割,可获得多个新个体,该种生殖方式是_______

(6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用_______技术。

 

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科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞(iPS),继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠。流程如下:

(1)从黑鼠体内获得体细胞后,对其进行的初次培养称为________,培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止分裂,这种现象称为________

(2)图中2细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得,该过程称为________;也可从灰鼠体内取出卵子,通过________后进行早期胚胎培养获得。

(3)图中重组囊胚通过________技术移入白鼠子宫内继续发育,暂不移入的胚胎可使用________方法保存。

(4)小鼠胚胎干细胞(ES)可由囊胚的________分离培养获得。iPS与ES细胞同样具有发育全能性,有望在对人类iPS细胞进行定向________后用于疾病的细胞治疗。

 

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下图为马铃薯番茄植株的培育过程示意图。请据图回答:

(1)步骤①②应使用_____________和果胶酶处理细胞,去除植物细胞的细胞壁,获得_____________

(2)步驟③常用的化学试剂是_____________,此过程的完成说明细胞膜具有_____________

(3)步骤⑤应用的技术名称是_____________。此过程需要_____________两种植物激素共同作用。

(4)图示培育杂种植株的方法是_____________,其最大优点是克服_____________的障碍。

 

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下图表示以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取与鉴定的操作程序,请分析回答下列问题:

(1)步骤一中,向鸡血细胞液中加入_____________并搅拌,可使鸡血细胞破裂。

(2)步骤二中,过滤后收集含有DNA的_____________

(3)步骤三、四的操作原理是DNA在_____________中溶解度不同而去除杂质,步骤四的主要操作是滴加蒸馏水并搅拌,当观察到溶液中_____________时,操作停止,过滤去除溶液中的杂质。

(4)氯仿密度大于水,能使蛋白质变性沉淀,与水和DNA均不相溶,且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度,依据氯仿的特性,步骤七的具体操作是将步骤六获得的滤液与等量的氯仿充分混合,静罝一段时间,吸取_____________,然后加入等体积的、冷却的_____________,静置2〜3min,溶液中会出现白色丝状物,这就是粗提取的DNA。

(5)步骤八:DNA遇_____________试剂,沸水浴5min,冷却后,溶液呈_____________色。

 

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图1为某草原生态系统的部分碳循环示意图,甲〜丁为生态系统的组成成分,2为该生态系统的部分能量流动示意图(不考虑未利用的能量)。据图分析回答:

(1)图1中,表示微生物分解作用的是___________(填序号),乙→丁过程碳的传递形式是_________

(2)图2中,表示鼠用于生长、发育、繁殖的能量是_____________(填字母)。若鼠摄入能量为2.2×l09kJ,粪便中能量为1.0×l09kJ,B中能量为0.8×l09kJ,狼同化能量为2.4×l09kJ,则该生态系统中鼠到狼的能量传递效率为_____________

(3)调査鼠的种群密度通常采用_____________法。狼能够依据鼠留下的气味去捕食,鼠同样也能够依据狼的气味或行为躲避措捕。此例说明,生态系统的信息传递能调节生物的_____________,从而维持生态系统的稳态。

(4)在草原生态系统向森林生态系统演替的过程中,生产者固定的CO2_____________(填“大于”、“等于”、“小于”)生物群落排出的CO2量,生态系统的_____________稳定性逐渐增强。

 

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