Question

【生物——选修3：现代生物科技专题】

我国一科研团队将小麦液泡膜Na⁺/K⁺逆向转运蛋白基因（TaNHX2基因）转移到水稻细胞内，获得了转基因耐盐水稻新品种。回答下列有关问题：

（1）为保证目的基因在水稻细胞中能够表达，运载体上应含有特定的______________。

A.复制原点    B.启动子     C.标记基因

（2）水稻的转化过程为：将水稻幼胚接种到诱导培养基上，经过___________伤组织，然后用___________法，将目的基因和相关功能片段整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上，最后诱导愈伤组织形成水稻植株。

（3）为验证外源基因整合到水稻基因组后是否转录，可从转基因植株的细胞中提取所有mRNA并反转录成

___________，再以反转录产物为模板，利用TaNHX2基因特异引物，通过__________方法进行基因扩增。若以根细胞为材料扩增结果为阳性（有产物生成），以叶细胞为材料扩增结果为阴性（无产物生成)，则说明_________________________________。

（4）将生长至4叶期的转基因幼苗转入高浓度的NaCl溶液中培养，进行耐盐实验，用非转基因幼苗作为对照。培养30天后观察现象，若_______________________________则说明转基因植株获得了耐盐特性。

Answer

启动子 脱分化 农杆菌转化法 cDNA（互补DNA） PCR 目的基因（TaNHX2基因）仅在根细胞中转录，未在叶细胞中转录 （回答“基因选择性表达”不给分） 转基因植株存活率高于非转基因植株（转基因植株叶片不变黄，非转基因植株叶片变黄，其它答案合理可给分）

【解析】分析：植物组织培养过程：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，进而形成完整的植株。目的基因的检测与鉴定1，分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术 ②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术 ③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；2，个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，为保证目的基因在水稻细胞中能够表达，运载体上应含有特定的启动子；

（2）幼胚经过脱分化过程，培养出愈伤组织，然后单子叶植物常用农杆菌转化法用法。

（3）有mRNA并反转录的产物是cDNA（互补DNA），PCR方法可以快速扩增目的基因。若以根细胞为材料扩增结果为阳性（有产物生成），以叶细胞为材料扩增结果为阴性（无产物生成），则说明目的基因（TaNHX2基因）仅在根细胞中转录，未在叶细胞中转录；

（4）在进行个体生物学水平检测时，若观察发现转基因植株存活率高于非转基因植株，则说明转基因植株获得了耐盐特性。