Question

尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，为探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示，实验步骤如图所示。

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4•7HO	葡萄糖	尿素	琼脂
1.4g	2.1g	0.2g	10g	1g	15g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定溶到1000mL，调pH为7.2

（1）培养基中加入尿素的目的是                  ，这种培养基从物理性质划分属于_______培养基。“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的     和     ，为了满足图示锥形瓶中目的菌对氧气的需求，应采用的操作方法是                   。

（2）图中将细菌（非硝化细菌）转到培养基上时，应采用              法接种，获得单个菌落。初步筛选出来的菌种，还需要用生化的方法作进一步的鉴定：在此培养基中接种并培养初步筛选的菌种，若PH         （降低/不变/升高），说明该菌种能够分解尿素。

（3）A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有____________(填序号)。

①由于土样不同  ②由于培养基被污染  ③由于操作失误  ④没有设置对照。

Answer

（1）筛选目的菌 固体（1分） 尿素 葡萄糖 振荡培养（或搅拌）

（2）稀释涂布平板 升高

（3）①②③

【解析】

（1）分析题图培养基配方可知，此培养基是以尿素为唯一氮源的培养基，这样只有能分解尿素的微生物才能生长，不能分解尿素的微生物因缺乏氮源而无法生长，起到了筛选能分解尿素的菌的作用．从物理形态看，培养基配方中含有凝固剂琼脂，属于固体培养基．“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的氮源和葡萄糖．为了满足图示锥形瓶中液体培养基中目的菌对氧气的需求，应采用的操作方法是振荡培养（或搅拌）．

（2）将图中的液体菌液转移接种到固体培养基上需要使用稀释涂布平板法接种．接种环需要进行灼烧灭菌．在此培养基中接种并培养初步筛选的菌种，尿素分解菌能够将尿素转化为氨而使pH升高，若PH升高说明该菌种能够分解尿素．

（3）该同学与其他同学获得的菌落数差异很大，可能的原因是采用的土样不同，培养基灭菌不彻底，培养基被污染，或者是实验过程中没有进行无菌操作。

【考点定位】微生物的分离和培养

【名师点睛】分析题干和题图可知，本题是通过实验探究土壤中微生物对尿素的分解作用，先分析题图获取信息，然后根据问题涉及的具体内容分析回答．本题的知识点是培养微生物的培养基，选择培养基的选择作用，分析培养基的配方以及为微生物提供的营养成分，主要考查学生运用所学的微生物的选择培养的知识解决生产、生活中问题的能力．