Question

塑料袋造成的“白色污染”早已成为地球公害，塑料袋的自然分解需要20-1000年不等．2008年7月3日加拿大媒体报道：16岁的高中生丹尼尔-伯德从土壤中找到了一类假单胞杆菌，能将聚乙烯塑料的自然降解过程缩短至3个月，而且分解产物只有水和二氧化碳．伯德也因此被誉为“塑料袋的克星”．以下是伯德寻找到聚乙烯降解菌的大致过程．
请回答：
 

（l）根据你的生活经验推测，伯德这项研究的“土壤样品”最可能取自于                。

（2）图中“…”表示对土壤悬浮液进行一系列的                     ，目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞．从而能在Ⅰ号培养基表面形成单个             。

（3）I号培养基属于           培养基，其作用是使目的菌能“脱颖而出”．如图采用的接种方法为   。使用Ⅱ号培养基的目的是使目的菌数目增多，培养基中必须包含水、无机盐、                    等基本营养成分．从物理性质来看，Ⅱ号培养基中不能添加                     。

（4）若要进行月季花药的离体培养，最好选择             期的花药，从宏观来判断通常择           ，采用的MS固体培养基中除含有多种大量元素和微量元素外，还需添加植物激素，其中主要是             。

（5）为避免杂菌污染培养物和环境，植物组织培养和微生物培养的培养基在接种前和完成实验后都要进行               。

（6）接种时要在                    操作。

Answer

（1）垃圾场（合理给分）

（2）梯度稀释；菌落

（3）选择；稀释涂布平板法；碳源、氮源；凝固剂（或琼脂）

（4）单核期；完全未开放的花蕾 生长素和细胞分裂素

（5）高压蒸汽灭菌；酒精灯火焰旁

【解析】

（1）要分离出能分解特定物质的目的菌，应该在富含该物质的场所进行取土，一般垃圾场塑料袋较多。

（2）从“目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞”可推知，土壤悬浮液应进行一系列浓度梯度的稀释。在培养皿中可得到由单个细菌形成的菌落。

（3）Ⅰ号培养基能筛选出分解聚乙烯塑料的目的菌，所以Ⅰ号培养基从功能上属于选择培养基。图中接种的方法经历多次浓度稀释，所以接种方法为稀释涂布平板法。Ⅱ号培养基的目的是使目的菌数目增多，即扩大培养，所以培养基中除了水和无机盐外，还应加入氮源和碳源等营养成分。一般扩大培养用的是液体培养基，所以不需要添加凝固剂（或琼脂）。

（4）月季的花药离体培养，一般选择单核期的花药进行培养，从宏观上分辨，一般选择完全没有开放的花蕾。植物组织培养所用的培养基一般要加入的主要激素是生长素和细胞分裂素。

（5）培养基在接种前要用高压蒸汽进行灭菌，完成实验后为了防止杂菌污染，还要用高压蒸汽进行灭菌，并且接种时为了防止空气的杂菌污染培养基，应在酒精灯火焰旁进行。

【考点定位】微生物的分离和培养

【名师点睛】

（1）无菌操作技术有消毒和灭菌，消毒有煮沸消毒法、巴氏消毒法和化学药剂消毒法，灭菌有灼烧灭菌法适用于接种工具、干热灭菌法适用于玻璃器皿和金属工具、高压蒸汽灭菌法适用于培养基及容器的灭菌。

（2）接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。
（3）植物组织培养是指利用特定的培养将离体的植物细胞、组织或器官培养成完整植株的过程。花药的离体培养、基因工程中的受体细胞的培养、植物体细胞杂交后杂种细胞的培养以及植物的大量快速繁殖都要用到植物组织培养技术。