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野生型大肠杆菌(E.coli)具有完整的LacZ基因,该基因编码的β-半乳糖苷酶...

野生型大肠杆菌Ecoli具有完整的LacZ基因,该基因编码的β-半乳糖苷酶由α片段和ω片段两部分组成,两部分均存在时可将无色化合物X-gal切割成半乳糖和深蓝色的物质5-溴-4-靛蓝,从而使整个菌落变为蓝色。DH5α是基因工程中常用的一种大肠杆菌诱变菌株,对氨苄青霉素敏感,其LacZ基因中编码ω片段的序列仍然保留,但编码α片段的序列缺失。

(1)根据中心法则,LacZ基因控制β-半乳糖苷酶合成的过程主要包括_____和______两个环节。

(2)某研究小组构建了质粒pXY-1,如图甲所示,该质粒含氨苄青霉素抗性基因Ampr和编码大肠杆菌β-半

乳糖苷酶α片段基因片段LacZ。图乙显示的则是Nae I、Hpa II和Kas I三种限制性内切酶的识别序

满分5 manfen5.com表示切割位点

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若以该质粒作为运载体,将外源目的基因图丙导入大肠杆菌DH菌株,在构建重组质粒时应选用的限制性内切酶是______。此外,还需用到的另一种酶是______。

(3)若用涂布有氨苄青霉素和X-gal的固体培养基筛选上一题中含目的基因的受体菌,下列说法中正确的

有______。多选

A没有导入任何质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为白色

B导入了pXY-1空载体质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为蓝色

C导入了pXY-1重组质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为白色

D导入了pXY-1重组质粒的DH5α细菌可以在该培养基上生长且菌落为蓝色

(4).现从上一题的固体培养基平板上挑取一个重组菌落,经扩大培养后提取质粒,分别用不同的限制性内

切酶处理并对酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳,结果如表所示:

所用限制性内切酶

所得条带长度

BamH I、Sca I双酶切

1230bp、2770bp

Hpa II、Sca I双酶切

460bp、1240bp、xbp

分别用不同的限制性内

切酶处理并对酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳,结果如表所示:据此可知,目的基因全长为______bp,在其内部存在______填限制酶名称的切割位点,表中字母x代表的数值应为______。

 

(1)转录 翻译 (2)KasI DNA连接酶 (3)BC (4)900 HpaII (2分) 2300 【解析】 试题分析:64.LacZ基因控制β-半乳糖苷酶合成的过程主要包括转录和翻译两个环节。 65.分析图示可知,目的基因两端有Kas I酶切割形成的黏性末端,因此在构建重组质粒时应选用的限制性内切酶是Kas I,此外,还需用到DNA连接酶。 66.已知 DH5α是基因工程中常用的一种大肠杆菌诱变菌株,对氨苄青霉素敏感,其LacZ基因中编码ω片段的序列仍然保留,但编码α片段的序列缺失;质粒pXY-1含氨苄青霉素抗性基因Ampr和编码大肠杆菌β-半乳糖苷酶α片段的基因片段LacZ’。用二者构建重组质粒,没有导入任何质粒的DH5α细菌,因对氨苄青霉素敏感,则在该培养基上不能生长,A项错误;导入了pXY-1空载体质粒的DH5α细菌,具有氨苄青霉素抗性,能表达β-半乳糖苷酶,培养基中的X-gal会被水解成蓝色,因此可以在该培养基上生长且菌落为蓝色,B项正确;导入了pXY-1重组质粒的DH5α细菌,具有氨苄青霉素抗性,可以在该培养基上生长,因编码α片段的序列缺失,不能表达β-半乳糖苷酶,培养基中的X-gal不会被水解成蓝色,大肠杆菌将形成白色菌落,C项正确,D项错误。 67.分析图甲可知,质粒pXY-1共含有3100bp;用质粒pXY-1为载体构建的的基因表达载体经BamH I、Sca I双酶切后,所得条带总长度为1230bp+2770bp=4000bp,比质粒pXY-1多出4000bp—3100bp=900bp,多出的这 900 bp即为目的基因全长。目的基因应插入启动子与终止子之间,据此并结合图示分析可知,在目的基因内部存在HpaII的切割位点。分别用两种双酶切割所得条带总长度应该相同,据此可推知表中字母x代表的数值应为4000bp—460bp—1240bp=2300bp。 考点:本题考查基因工程的相关知识,意在考查学生能从题图中提取有效信息并结合这些信息,运用所学知识与观点,通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理,做出合理的判断或得出正确结论的能力。  
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①胃泌素通过         运输到达胃腺细胞,促进胃液分泌。若胃酸分泌过多,又可抑制胃泌素的分泌,这种调节方式叫做          

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(3)为探究两种调节机制对头期胃液分泌的影响,有人用同一只狗连续进行了以下实验:

步骤

实验条件

4小时胃液分泌量

1

假饲

+ + + + + + + + +

2

切除胃窦,再假饲

+

3

假饲,并注射一定量的胃泌素

控制胃泌素的注射剂量,使胃液分泌量与步骤1相当

+ + + + + + + + +

4

只注射与步骤3相同剂量的胃泌素,但不假饲

+ + + +

假饲是让狗吃肉,但吞下的肉从食道上的人工瘘口掉出,不进入胃;“+”数量表示胃液分泌量多少

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②步骤3的目的是                                

③步骤4是为了确定在           调节作用下的胃液分泌量。

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(5)图中属于氧化分解反应的过程为         填编号

(6)脂肪分解过程中会产生酮酸,严重时会引起酸中毒,试分析糖尿病病人较易发生酸中毒的原因是______。

 

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