下图表示畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法,请分析回答下列有关问题。
（1）方法Ⅰ和方法Ⅱ培育优良种牛的本质区别是方法Ⅰ涉及的生殖方式为 ,方法Ⅱ涉及的生殖方式为 。
（2）过程①应用的技术是 。
（3）过程②常用 激素处理,目的是使B牛 ,从B牛体内获得的卵母细胞需要培养到 （时期）才能与精子结合。
（4）A牛的精子在体外完成受精,通常采用的获能方法有培养法与 法。卵子受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙能够观察到 。防止多精入卵的生理反应有 和 。
目前单克隆抗体的应用受到越来越多的重视，如作为诊断试剂、制成生物导弹等。请根据所学知识，回答下列问题：
（1）制备单克隆抗体涉及到 和 技术。
（2）为获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞需要多次筛选，其中第一次筛选用 培养基。经初次筛选的杂交瘤细胞,还需进行 （操作）。
（3）杂交瘤细胞的增殖方式为 分裂，在此过程中其遗传性状 。
（4）杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养或注射到小鼠腹腔内,这样可从 或 中提出大量的单克隆抗体。
（5）单克隆抗体与常规的血清抗体相比最大的优点是 。
下图所示为科学家利用番茄叶细胞和马铃薯叶细胞杂交培育“番茄-马铃薯”植株的过程,请回答下列问题。
（1）①②过程使用了 酶,以去除植物的细胞壁。
（2）过程③若在化学药剂 的作用下会发生植物原生质体的融合。
（3）与过程④有关的细胞器主要是 , ⑤是 过程，过程⑥的实质是 。
（4）若要获取转基因植物人工种子，需培养到________阶段，再进行人工种皮的包裹；如用植物细胞实现目的基因所表达的蛋白质类药物的工厂化生产，培养到________阶段即可。
（5）植物体细胞杂交技术在克服 方面,取得了巨大突破。
下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：
（1）图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制酶切取目的基因、切割质粒。限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
① 画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。
②在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接？ 理由是 。
（2）以上图示中基因工程的核心是 （用序号表示）,除了目的基因和标记基因外,其上还应包括_____________和_____________。
（3）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是 。目的基因能否在受体母猪体内稳定遗传的关键是 。这需要检测才能确定，检测采用的方法是_____________。
（4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是： （用数字表示）。
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列
③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）
④表达出蓝色荧光蛋白
在农业用地中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度一定，该除草剂的培养基不透明）。
（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行________处理。
（2）要从________的土壤中分离目的菌，上述培养皿中培养基的特点是：________体培养基且以________。若需要调节培养基pH，应该在各种成分都溶化后且分装________（填“前”或“后”）进行。对培养基进行灭菌，常采用的方法是________。
（3）若对活菌进行计数，常用的接种方法为_____________。
（4）培养后发现，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是________________或有氧条件抑制了这些细菌的生长。
（5） 为了计数微生物的数量，一位同学在4个平板培养基上分别接种稀释倍数为106的土壤样液0．1mL，培养后菌落数分别为155、160、176、149个，则每毫升原土壤样液中上述微生物数量为___________。
科学家利用植物组织培养的方法,已经把许多植物的离体的组织或细胞,培养成了完整的植物体 。菊花组织培养的基本过程如下：请回答下列问题。
（1）图中 ①②过程分别代表____________、____________。
（2）进行菊花组织培养的基本实验步骤是：制备MS固体培养基、 、接种、培养、移栽、栽培。培养外植体的培养基中常用的凝固剂是__________。
（3）接种若干天后，若发现有的锥形瓶长出菊花幼苗，有的锥形瓶培养失败还长出杂菌菌落,原因可能是___________________________。
（4）实验室进行植物组织培养时常用MS培养基主要成分包括大量元素、微量元素和______。在配制好的培养基中，常常需要添加植物激素，植物激素的用量比例、 、__________会影响实验结果,其中关键性的植物激素是生长素和____________。（假如两者的用量比例用x表示） ,愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根，但分化出了芽，其原因可能是培养基中的x值_________（填”偏高”或”偏低”）。
