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下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图,据图回答: (...

下图为我国首例绿色荧光蛋白GFP转基因克隆猪的培育过程示意图,据图回答:

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1图中通过过程①、②形成重组质粒,需要限制酶切取目的基因、切割质粒。限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。

画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。

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②在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接?       理由是                                                       

2以上图示中基因工程的核心是      用序号表示,除了目的基因和标记基因外,其上还应包括__________________________

3过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时,采用最多也最有效的方法是           。目的基因能否在受体母猪体内稳定遗传的关键是                          。这需要检测才能确定,检测采用的方法是_____________

4目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白,黄色荧光蛋白等,采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是:           用数字表示

①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸

②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列

③蓝色荧光蛋白基因的修饰合成

④表达出蓝色荧光蛋白

 

(1)① ②可以连接 因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的 (2) ② 启动子 终止子 (3)显微注射技术 目的基因是否插入到受体细胞的染色体DNA上 DNA分子杂交技术 (4)②①③④ 【解析】 试题分析: (1)①根据题目已知条件画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。 ②因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的,所以在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能连接起来。 (2)基因工程的核心步骤是②基因表达载体的构建;除了目的基因和标记基因外,基因表达载体上还应包括启动子和终止子。 (3)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时,采用最多也最有效的方法是显微注射技术;目的基因能否在受体母猪体内稳定遗传的关键是目的基因是否插入到受体细胞的染色体DNA上;检测目的基因是否插入到受体细胞的染色体DNA上采用的方法是DNA分子杂交技术。 (4)采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是:②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列→①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸→③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)→④表达出蓝色荧光蛋白。 考点:本题考查基因工程、蛋白质工程的相关知识,意在考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识的网络结构的能力。  
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考点分析:
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在农业用地中发现一种广泛使用的除草剂含氮有机化合物在土壤中不易降解,长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌已知该除草剂在水中溶解度一定,该除草剂的培养基不透明

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1制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行________处理。

2要从________的土壤中分离目的菌,上述培养皿中培养基的特点是:________体培养基且以________。若需要调节培养基pH,应该在各种成分都溶化后且分装________填“前”或“后”进行。对培养基进行灭菌,常采用的方法是________。

3若对活菌进行计数,常用的接种方法为_____________。

4培养后发现,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是________________或有氧条件抑制了这些细菌的生长。

5 为了计数微生物的数量,一位同学在4个平板培养基上分别接种稀释倍数为106的土壤样液01mL,培养后菌落数分别为155、160、176、149个,则每毫升原土壤样液中上述微生物数量为___________。

 

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科学家利用植物组织培养的方法,已经把许多植物的离体的组织或细胞,培养成了完整的植物体 。菊花组织培养的基本过程如下:请回答下列问题。

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1图中 ①②过程分别代表________________________

2进行菊花组织培养的基本实验步骤是:制备MS固体培养基、             、接种、培养、移栽、栽培。培养外植体的培养基中常用的凝固剂是__________。

3接种若干天后,若发现有的锥形瓶长出菊花幼苗有的锥形瓶培养失败还长出杂菌菌落,原因可能是___________________________。

4实验室进行植物组织培养时常用MS培养基主要成分包括大量元素、微量元素______在配制好的培养基中,常常需要添加植物激素,植物激素的用量比例         __________会影响实验结果,其中关键性的植物激素是生长素和____________。假如两者的用量比例用x表示 ,愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根,但分化出了芽,其原因可能是培养基中的x值_________偏高偏低

 

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研究人员成功地从土壤中筛选到能产生纤维素酶的微生物请就如何从土壤中获得纤维素分解菌回答以下问题。

1纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即C1酶、CX酶和____酶。

2若获得纯净的菌株,常采用平板划线的方法进行接种,此过程所用的接种工具是_________,操作时采用的灭菌方法是_______

3刚果红可以与纤维素等多糖形成______色复合物,但并不与水解后的______________发生这种反应。常用的刚果红染色法有两种:第一种是先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应;第二种是在_______时就加入刚果红。_______第一种、第二种方法会使菌落之间发生混杂。

4如果观察到产生_______的菌落,说明可能获得了纤维素分解菌。为了确定是纤维素分解菌,还需要进行发酵产纤维素酶的实验。纤维素酶的测定方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的_______进行定量的测定。

 

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生物技术实践与人们生产和生活密切相关。请回答下列有关问题:

1在制作腐乳的过程中,加盐的作用是                    ;配制卤汤加酒的作用除了抑制微生物的生长外,还能         。其中酒的含量应控制在  左右

2蔬菜在腌制过程中,会产生亚硝酸盐。亚硝酸盐一般________不会危害人体健康,其含量测定的原理是:在________条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生_________反应后,与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成___________色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较,估算出的亚硝酸盐含量如图曲线所示,据图可以得出的结论是:                                      

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下面是果酒和果醋制作的实验流程和某同学设计的果酒和果醋的发酵装置。根据图示回答下列问题:

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1请将图1中的实验流程补充完整。

2在葡萄酒的自然发酵过程中起主要作用的是附着在__________的野生型酵母菌,除去葡萄梗应在冲洗_______完成从而避免_________________________________________

3在图2中葡萄汁装入发酵瓶时要留有约1/3 的空间的原因是既有利于酵母菌的有氧呼吸,又有利于_____。果酒变为果醋的原理_____________填化学反应式

4为了使酵母菌大量繁殖成为优势种,需要通入氧气和严格控制温度。制果酒时要将温度控制在________℃,而制果醋时要将温度控制在________℃。

5葡萄酒呈现红色的原因是_____________________。

 

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