Question

某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混合在一起。请你完成分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的实验步骤，并回答有关问题：

⑴主要步骤：

①制备两种培养基：一种是＿＿＿＿培养基，另一种＿＿＿＿＿的培养基。分别分成两份，依次标上A、A′和B、B′，备用。

②分别向A、B培养基中接种＿＿＿＿＿＿。

③接种后，放在恒温箱中培养3～4天。

④分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌种，接种到A′、B′培养基中。

⑤接种后，把A′、B′培养基放入恒温箱中培养3～4天。

⑵回答问题：

在步骤①中，为保证无杂菌污染，实验中应采用的主要措施有                                  。

第④⑤两个步骤的目的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

Answer

（1）无氮 加青霉素 混合菌

（2）培养基高压蒸汽灭菌 接种环在酒精灯火焰上灭菌 接种过程在酒精灯火焰附近进行 获得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌

【解析】

试题分析：

（1）将微生物进行分离一般采用选择培养基，选择培养基是在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长。圆褐固氮菌是自生固氮菌，能在无氮培养基上生长繁殖，而酵母菌则不能；青霉素不影响酵母菌等真菌的生长繁殖，却会抑制圆褐固氮菌等原核生物的生长繁殖。根据这一原理可将两种微生物分离开来。

（2）为保证无杂菌污染，实验中应对实验材料和用具进行灭菌处理。实验中对培养基和培养皿灭菌的方法是高压蒸气灭菌，对接种环等金属用具在酒精灯火焰上灼烧灭菌，接种时要在酒精灯火焰附近进行操作。为获得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌，可以用选择培养基重复进行选择培养。

考点：本题考查微生物培养的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。