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【四川省绵阳中学实验学校2017届高三5月模拟理综生物试题】下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请根据图回答相关问题：
（1）为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用________________________的培养基进行分离，并加入________指示剂进行鉴别。 （2）若取土样5g，应加入____________ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成如图所示的不同浓度的土壤溶液，分别吸取0.1mL的稀释液涂布到固体培养基上，这种接种方法称为________________。某同学用该方法接种后，在某个平板上没有得到菌落，可能的原因是_______________________________________ （3）将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计符合要求的菌落数，结果如下表，其中_______________倍的稀释比较合适。
（4）若需要将分离的菌种进行长期保藏，应使用的方法是_______________________。
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| 2. 难度：中等 | |
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【2018《单元滚动检测卷》高考生物（人教版,江苏专用）精练检测十一生物技术实践】下面的图甲表示酵母菌、硝化细菌和乳酸菌在半固体培养基中的生长情况，图乙表示这三种菌的增殖速度与氧气浓度之间的关系，请据图回答：
(1)图乙中a、b、c三条曲线依次表示图甲________号试管中微生物在不同氧气浓度中的增殖速度。 (2)研究发现，青霉素能破坏细菌的细胞壁并在细菌细胞的繁殖期起杀菌作用。如果培养基中混杂了这三类微生物，请设计实验，利用改变培养基成分等培养条件，将酵母菌和硝化细菌分离出来。 ①主要步骤： A．分别配制不含________的培养基(A)和加入______的培养基(B)，分别灭菌。 B．分别接种混合液放在适宜条件下培养。 C．观察结果。 ②结果：在A培养基上生存的是________，在B培养基上生存的是________。 (3)微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是__________________。
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| 3. 难度：中等 | |
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【河南省2017年高考（全国1卷）诊断卷（B）理综生物试题】LB液体培养基和LB固体培养基是微生物实验室中较常用的一种培养基，其配方为10g蛋白胨、10g/L酵母提取物、5g/L氯化钠等，主要用于培养细菌、扩增菌种数量。某研究组开展了氧气对微生物生长、繁殖的影响实验，请回答下列问题： （1）要配制供微生物生长、繁殖的培养基，其中一般都含有________________________________和无机盐等。有些微生物对某些特殊营养物质及____________等条件有特殊要求。 （2）将各类微生物用____________从斜面培养基接种于灭菌过的LB液体培养基中，进行扩大化培养。 （3）将含有LB固体培养基（LB液体培养基中加15g琼脂粉，刚配好，尚未凝固）的锥形瓶放入____________中进行灭菌。灭菌完成后将锥形瓶取出，待温度下降到60℃（不烫手的温度）时，用____________擦拭桌面和双手，在超净工作台中的____________旁将锥形瓶中的LB培养基分装到一系列试管，并做标记。 （4）当试管温度下降到40 ℃（培养基还是液态）时，用灭菌过的移液器吸取0.1mL的各类微生物悬液加入相应试管中并封口，双手快速搓动试管，使菌种均匀分布于培养基内后迅速将封口的试管放置在___条件下使培养基凝固。 （5）将上述试管放置于常温条件下培养48小时后观察实验结果，下图中可表示制作果酒的菌种的分布图的是____________。
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【湖南省长郡中学2017年高考模拟卷二理科综合生物试题】水污染是全球性的环境问题，微生物降解是水污染治理的有效手段之一。聚乙烯醇（PVA）是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，请回答下列问题： （1）下表是筛选出能高效分解PVA的细菌的培养基配方，表中X物质最可能为_______________。实验中还应设置完全培养液对照组，将菌液稀释相同的倍数，对照组培养基上生长的菌落数 目应明显__________（填“多于”或“少于”选择培养基上的数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。）
（2）要测定土壤稀释液中微生物的数目，可在显微镜下用___________计数板直接计数。若将100mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后，取0.1mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落，则100mL原菌液中有PVA分解菌_______个，该方法的测量值与实际值相比一般会______________________（填“偏大”、“偏小”或“相等”）。 （3）要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入_________________用于鉴别PVA分解菌。若用上述培养基比较不同菌株降解PVA能力的大小，请用简洁的语言写出设计思路：___________________________________。
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【湖南省长沙市长郡中学2017届高三下学期临考冲刺训练理科综合试题生物试题】对十二烷基苯磺酸钠（LAS）是洗涤剂的主要成分，LAS对人体的皮肤、血液、肝脏有一定的危害，LAS不易被生物降解，从而容易造成环境污染。某同学尝试从长期被洗涤剂污染的土壤中筛选出LAS降解菌，并对该菌种进行培养和计数。回答下列问题： （1）该同学从长期被洗涤剂污染的土壤中取样后，将样本置于在以_______________作为唯一碳源的液体培养基上进行培养，该培养基为_____________，其作用是_____________。 （2）经过初步培养后，该同学对获得的LAS降解菌溶液进行梯度稀释，吸取105稀释倍数的降解菌液各0.1mL，分别涂布在三个平板上，一段时间后形成的菌落数依次为20、14、14，该同学以平均菌落数16进行计数。 ①以平均菌落数16进行计数，可求得原菌液中LAS降解菌的浓度为_________个/mL。 ②你认为该同学的计数方法是否正确？________（填“正确”或“不正确”），说明理由____________。 （3）稀释涂布平板法不适宜用于某些食品工业（比如酸奶等）的质量检测，原因是__________，此时应采用_______________统计细菌的数目。
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| 6. 难度：中等 | |
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【广东省中山市2017届高三5月模拟生物试题】【生物-选修1：生物技术实践】毒死蜱(C9H11C13NO3PS)是一种有机磷杀虫剂，长期使用将导致土壤中农药残留严重。某研究小组从长期施药的韭菜温室土壤（偏酸性）里分离出能降解毒死蜱的木霉，并对其降解特性进行初步研究。请回答： （1）用于分离木霉菌种的培养基属于__________________培养基。配制此培养基时，应加入____________作为唯一碳源。接种前，将培养基在适宜温度下放置适当的时间，观察培养基__________________，以确定培养基是否被污染。 （2）纯化木霉时，统计出0.2 mL的稀释液在稀释倍数为105的平板上的平均菌落数为40个，则每mL样液中的菌落数为__________个。用此法测定木霉数量，实际活菌数量要比统计的菌落数量______，原因是________________________________________________。 （3）探究pH对木霉降解毒死蜱活性的影响 ①研究小组向不同pH的培养基中分别加入100 mg/L 毒死蜱，5天后检测毒死蜱的残留量（图1）。由图可推知：在偏酸性的土壤中，__________________________。
②研究小组向不同pH的培养基中分别加入100 mg/L 毒死蜱，再分别接种1 mL木霉悬液，混合均匀，5天后检测毒死蜱的残留量（图2）。在此韭菜温室土壤中，若要提高木霉对毒死蜱的降解活性，可对土壤作何处理？_____________________________。
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| 7. 难度：中等 | |
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【山西省孝义市2017届高三下学期考前热身训练理科综合生物试题】在某实验中选用YMA根瘤菌固体培养基来培养费氏中华根瘤菌（自生固氮菌），配方如下表所示。
回答下列问题。 （1）按物理性质，培养基可分为__________和固体培养基；培养基的配置过程具有如下步骤：①灭菌 ②计算 ③倒平板 ④调pH ⑤称量 ⑥溶化 ，正确是顺序为____________。费氏中华根瘤菌以________作为碳源。 （2）想要测定某一时期活菌数量，可选用_____________法进行计数。为了保证结果准确，一般选择菌落数在____________的平板进行计数。 （3）此实验是如果防止污染的？__________________________________________。
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【山西大学附属中学2017届高三下学期3月模块诊断理综生物试题】生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。请回答下列问题： （1）培养大肠杆菌所用的LB培养基一般用________法灭菌。检验大肠杆菌的含量时，通常将水样用_________进行一系列的梯度稀释。 （2）将稀释后的水样分别接种到LB固体培养基，_______（填“正置/倒置”）于恒温培养箱，在_____℃条件进行培养。用该方法统计样本菌落数时_________（填“需要/不需要”）设置对照组。 （3）对于生活饮用水中大肠杆菌的数量统计，也可以采用滤膜法，该法是利用滤膜的直径_______（填“大于/小于”）大肠杆菌的直径，将大肠杆菌留在滤膜上进行的计数。 （4）下图表示培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列相关叙述错误的是_____（多选）。
A．步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置 B．步骤②接种环火焰上灼烧后迅速蘸取菌液后划线 C．步骤③多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落 D．步骤④恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数
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