| 1. 难度：困难 | |
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苹果醋是指以苹果汁经发酵而成的原醋，再兑以苹果汁等原料而制成的饮品。既有淡淡的醋味，又有果汁的香甜，喝起来非常爽口，是目前大众非常喜爱的饮品。下图是苹果醋的制作简图，请回答：
(1)在苹果汁的生产中，为了提高出汁率而要添加的酶是____________________。为了便于工业化使用，常对酶采用__________技术，如吸附法、包埋法等。 (2)采用________方法可以最大限度地保存苹果汁的色香味和营养价值。 A．15 min高压蒸汽灭菌 C．70%酒精消毒 (3)过程①中用到的微生物是__________，若培养液中乙醇浓度超过________往往使其死亡。 (4)苹果醋的原料是苹果酒和蒸馏水的混合物，两者的比例一般为________。 A．1∶2 B．1∶4 C．2∶1 D．4∶1 (5)过程②用到的微生物是__________。该过程发酵阶段，要向装置中通入______________。
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| 2. 难度：中等 | |
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有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境，研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解，分离能降解苯磺隆菌株的实验过程如下图所示。请回答问题：
(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、________、________四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是_________________________________。 (2)纯化菌株时，通常使用的划线工具是________。在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是____________________________________________________。 (3)若要检测土样中的细菌含量，应采用__________法。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养了一段时间，这样做的目的是____________________________________。 然后，将1 mL土壤溶液稀释100倍，在3个平板上分别接入0.1 mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升土壤溶液中的活菌数为________个。
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| 3. 难度：中等 | |
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微生物与我们生活健康有着密切的联系。请回答下列问题： (1)实验室常用的灭菌方法为______________，如果实验器材不能遇水，则用__________。 (2)微生物的分离提纯方法主要有____________和____________法。 (3)培养微生物的培养基根据用途不同，物理性质有所差异。扩大培养一般用________培养基，分离菌种用________培养基。它们在物理性质上的不同主要是________________。 (4)某些微生物能利用尿素是因为它们能合成和分泌____________。其分解尿素的方程式为：________________________________________________________________________。
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| 4. 难度：中等 | |
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某研究小组研究了不同浓度的土霉素(一种抗生素)对大肠杆菌生长的影响，实验结果见图1。
(1)实验结果表明，对大肠杆菌抑制作用最明显的是浓度为________(图1中数字)的土霉素。 (2)该实验中，接种大肠杆菌时所使用的接种方法是__________，在培养和接种大肠杆菌时要特别注意进行________操作。为更好地体现土霉素对大肠杆菌的抑制作用，实验中还应增加一组__________________作为空白对照。为了严格控制土霉素的剂量，对圆纸片的要求是____________。为减少实验误差，每一浓度的土霉素还要制备__________________。 (3)长期大量使用土霉素容易引起大肠杆菌产生抗药性，这一过程的实质是大肠杆菌种群的__________________发生了变化。 (4)该研究小组运用上述实验方法研究了相同浓度的A、B、C三种不同抗生素对大肠杆菌生长的影响。请在图2中表示这一处理方案(可模仿图1加以必要的注解)。 __________________
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| 5. 难度：困难 | |
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为获取土壤中的芽孢杆菌，某同学进行了相关实验，操作流程如下：
(1)上图中步骤A为____________，步骤B为____________。要判断培养基灭菌是否彻底，可采用的方法是__________________________________________。 (2)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑______、______和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、________等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。 (3)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。 (4)微生物与人类的生活、健康有着密切的联系。请回答下列有关微生物的问题。 在果醋、泡菜的制作过程中，需要氧气的是________的制作。在制作果醋过程中，榨取的果汁非常浑浊，解决的方法是__________。根据微生物的特点，可以利用相应的培养基进行分离或培养，例如用__________的培养基培养苹果青霉，以提高果胶酶的产量。
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| 6. 难度：困难 | |
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烧伤病人容易感染绿脓杆菌，引起化脓性感染，比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是经典的抗绿脓杆菌的药物。临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，从病人身上获取少量样本，按照一定的实验步骤操作，以确定该病人体内绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性。 (1)获取绿脓杆菌单菌落：配制适于绿脓杆菌生长的培养基、培养基中的营养成分一般含有________、________、水和无机盐，调节pH至7，灭菌处理，待培养基冷却至50 ℃时，在________________附近倒平板。经过选择培养、鉴别等步骤获得单菌落。 (2)检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性：取该单菌适当稀释，用__________法接种于固体培养基表面，使其均匀生长，布满平板。将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素的同样大小的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，适宜条件下培养一段时间，结果是含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈，这说明绿脓杆菌对上述抗生素______________________________________；含头孢菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小，这说明______________________；含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小，且比阿培南透明圈中出现了一个菌落，请推测此菌落产生的可能原因：一是__________________，二是______________________________。 (3)根据上述实验结果，为达到抗绿脓杆菌的目的，对于该患者来说最好应选用抗生素__________。
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| 7. 难度：中等 | |
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青蒿素是从黄花蒿茎叶中提取的抗疟疾药物。通过组织培养获得青蒿素的途径如图所示。请据图回答：
(1)图中①和②分别表示黄花蒿组织培养过程中细胞的____________和__________过程。 (2)配制生芽培养基时生长素比细胞分裂素的比值应较______(填“高”或“低”)，配制培养基时通常加入凝固剂________。配制后还须用____________法对培养基进行灭菌。外植体在接种前通常可用体积分数为________的酒精进行消毒。 (3)为了得到高产细胞系，通常要用酶解法获得原生质体，用________酶和________酶在0.5～0.6 mol·L－1的__________溶液环境(较高渗透压)下去壁。 (4)科研人员利用转基因技术用细菌作为工程菌获得青蒿素的前体青蒿酸。先将目的基因与含有抗青霉素基因的质粒形成____________，再与细菌菌液混合导入目的基因。用玻璃刮刀将稀释后的菌液用______法接种到含________的固体培养基上，经培养形成________，再进一步筛选和培养。若最终能从细菌中提取到__________，则说明转基因成功。
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| 8. 难度：困难 | |
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下图是利用白菜、萝卜、黄瓜、胡萝卜等腌制泡菜的流程示意图。
请据图回答： (1)已腌制过的泡菜汁含丰富的____________________，添加泡菜汁相当于接种了已经扩增的菌种，可达到______________的目的。 (2)添加的盐水需要煮沸并冷却才可使用，原因是______________________________。 (3)下列对泡菜腌制的叙述，错误的是__________。 A．装罐前需用热水洗涤泡菜罐 B．白酒的主要作用是杀菌和调味 C．腌制过程需要定期开罐通气 D．发酵产物包括有机酸和醇类物质等 (4)泡菜这类食物中含有一定量的________，对人体具有致癌作用。该物质与对氨基苯磺酸发生重氮化反应形成__________色产物，可用__________检测其含量。 (5)为研究泡菜腌制过程中起作用的微生物种类及比例，需要进行分离培养。下列叙述错误的是__________。 A．配制培养基时，需添加适量的凝固剂 B．接种方法可选择划线分离法或涂布分离法 C．需设置未经接种的空白对照 D．培养需在无氧条件下进行
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