| 1. 难度：中等 | |
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下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是（ ）
A．①②③④ B．①②④③ C．①④②③ D．①④③②
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| 2. 难度：中等 | |
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下图是获得抗虫棉的技术流程示意图。卡那霉素抗性基因（kanr）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。不正确的是（ ）
A．构建重组质粒过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶 B．愈伤组织的分化产生了相同基因型的植株 C．卡那霉素抗性基因（kanr）中不该有该过程所利用的限制性核酸内切酶的识别位点 D．抗虫棉有性生殖后代能保持抗虫性状的稳定遗传
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| 3. 难度：中等 | |
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以下为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图。据图分析，下列说法正确的是（ ）
A．催化①过程的酶是RNA聚合酶 B．④过程发生的变化是引物与单链DNA结合 C．催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，都能耐 D．如果RNA单链中A与U之和占该链碱基含量的40%，则一个双链DNA中，A与U之和也占该DNA碱基含量的40%
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| 4. 难度：中等 | |
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应用生物工程技术培育人们需要的生物新品种或新产品，提高了经济效率。下图表示培育生物新品种的过程，请据图判断下列叙述中不正确的是（ ）
A．图中①过程需要的工具酶是限制性内切酶和DNA聚合酶 B．图中⑤过程利用的原理是细胞的全能性 C．培养转基因动物常用的受体细胞是受精卵 D．图中①～⑤过程中不是都发生了碱基互补配对现象
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| 5. 难度：中等 | |
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我国研制的复制型艾滋病疫苗，是把艾滋病病毒RNA的几个重要片段经某种处理后插入天花病毒DNA中，形成重组病毒疫苗。该疫苗在人体内具有复制能力，产生的抗原蛋白可以持续刺激免疫系统，使人产生较强的免疫能力。在该疫苗研制过程中（ ） ①使用了逆转录酶 ②运用基因工程手段，用质粒作载体 ③可利用培养的动物细胞培养天花病毒 ④体现了天花病毒的间接使用价值 A．①② B．③④ C．①③ D．②④
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| 6. 难度：中等 | ||||||||||||||||
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进行基因工程设计时，下表各组的实验目的与所选择材料或方法配置错误的是（ ）
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| 7. 难度：中等 | |
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研究人员将生长激素基因通过质粒导入大肠杆菌细胞，使其表达，产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而大肠杆菌不带有任何抗性基因。下列叙述正确的是（ ） A．导入大肠杆菌的质粒一定为重组质粒 B．RNA聚合酶是构建该重组质粒必需的 C．可用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒 D．在含氨苄青霉素的培养基中不能生长，但在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌
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| 8. 难度：中等 | |
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金茶花是中国特有的观赏品种，但易得枯萎病。科学家在某植物中找到了抗枯萎病的基因，下图所示的方法培育出了抗枯萎病的金茶花新品种。相关叙述正确的是（ ）
A．图中①②在基因工程中依次叫做基因表达载体、目的基因 B．形成③的操作中使用的酶有限制酶、DNA聚合酶和DNA连接酶 C．由④培育至⑤过程中，依次经历了脱分化、再分化过程 D．在⑤幼苗中检测到抗枯萎病基因标志着成功培育新品种
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| 9. 难度：中等 | |||||||||||||||||
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下表为常用的限制性核酸内切酶及其识别序列和切割位点（注：表中Y为C或T，R为A或G）。据表分析，可以得到的结论是（ ）
A．限制酶的切割位点在识别序列的中间 B．限制酶切割后都形成黏性末端 C．不同限制酶切割后形成的黏性末端都相同 D．一种限制酶可能识别多种核苷酸序列
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| 10. 难度：中等 | |
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北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强。下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是（ ）
A．过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序 B．将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白 C．过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选 D．应用DN
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| 11. 难度：中等 | |
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将ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒 pET28b 导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是（ ） A．每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒 B．每个质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 C．每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada D．每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子
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| 12. 难度：中等 | |
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如图是利用基因工程技术培育转基因植物，生产可食用疫苗的部分过程示意图，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。下列说法错误的是（ ）。
A．图示过程是基因工程的核心步骤 B．表达载体构建时需要用到限制酶 SmaⅠ C．抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来 D．除图示组成外，表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构
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| 13. 难度：中等 | |
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下图表示转基因动、植物的培育过程。据图分析下列有关叙述正确的是（ ）
A．通过③过程培育转基因抗虫棉依据的原理是基因重组 B．①过程需要限制性核酸内切酶、DNA聚合酶等酶 C．受体细胞A，B一般均是受精卵 D．
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| 14. 难度：中等 | |
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限制性核酸内切酶能识别特定的DNA序列并进行剪切，不同的限制性核酸内切酶可以对不同的核酸序列进行剪切。现以3种不同的限制性核酸内切酶对6．2 kb大小的线状DNA进行剪切后。用凝胶电泳分离各核酸片段，实验结果如图所示。请问：3种不同的限制性核酸内切酶在此DNA片段上相应切点的位置是 （ ）
A． B． C． D．
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| 15. 难度：中等 | ||||||||||||||||||||||||||
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利用基因工程技术将目的基因导入相应生物体内使之表达，可以得到人们所需要的产品。下列选项中，不可能的是（ ）
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| 16. 难度：中等 | |
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盐害是全球水稻减产的重要原因之 A．该基因工程涉及多个目的基因，多种载体 B．该基因工程所需的限制性核酸内切酶可能有多种 C．只要目的基因进入水稻细胞，水稻就会表现出抗盐性状 D．可通过将水稻种植到有农杆菌的土壤中观察目的基因是否表达
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| 17. 难度：中等 | |
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下图为抗除草剂转基因烟草的构建过程，下列叙述错误的是（ ）
A．构建重组质粒时需要限制酶和DNA连接酶 B．③常采用农杆菌转化法将目的基因导入烟草细胞内 C．用含大量霉菌的培养基筛选转基因烟草细胞 D．④需经植物组织培养过程才能获得抗除草剂转基因烟草
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| 18. 难度：中等 | |
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科学家创造了“基因敲除”的方式：用外源基因整合到小鼠胚胎干细胞的DNA同源序列中，使某一个基因被取代或破坏而失活，形成杂合体细胞。然后将“修饰”后的胚胎干细胞植入小鼠的早期胚胎，生成嵌合体小鼠。科学家已经利用上述技术成功地把人类囊肿性纤维化病的致病基因移植到小鼠身上，培育出了患囊肿性纤维化病的小鼠。下列有关叙述最可能错误的是（ ） A．这种嵌合体小鼠长大后体内存在外源基因，而且可能会遗传给后代 B．在“基因敲除”中需要用到限制性核酸内切酶等 C．通过“基因敲除”方式导致的变异类型属于基因突变 D．基因敲除技术有利于人类对某些遗传因素引发的疾病进行研究
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| 19. 难度：中等 | |
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基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。根据图判断下列操作正确的是 （ ）
A．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割 B．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割 C．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割 D．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割
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| 20. 难度：中等 | |
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如图是利用基因工程培
A．③侵染植物细胞后,重组Ti质粒未整合到④的染色体上 B．②的构建需要 C．④的染色体上若含抗虫基因,则⑤就表现出抗虫性状 D．⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了不可遗传变异
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| 21. 难度：中等 | |
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图为高等动物细胞亚显微结构模式图。下列有关描述中存在错误的一项是（ ）
A．①、③、④、⑤、⑥组成该细胞的生物膜系统 B．⑥为该细胞生命活动的进行提供大量能量 C．③、⑤等使得细胞内同时进行不同化学反应 D．③与①、④有直接联系，与⑤有间接联系
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| 22. 难度：中等 | |||||||||||||||||||||||||||||||
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下列对生物体中有关化合物的鉴定实验，不正确的是（ ）
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| 23. 难度：中等 | |
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在培养人食管癌细胞的实验中，加入青蒿琥酯（Art），随着其浓度升高，凋亡蛋白Q表达量增多，癌细胞凋亡率升高。下列叙述错误的是 A．为初步了解Art对癌细胞的影响，可用显微镜观察癌细胞的形态变化 B．在癌细胞培养液中加入用放射性同位素标记的Art，可确定Art能否进入细胞 C．为检测Art对凋亡蛋白Q表达的影响，须设置不含Art的对照试验 D．用凋亡蛋白Q饲喂患癌鼠，可确定该蛋白能否在动物体内诱导癌细胞凋亡
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| 24. 难度：中等 | |
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某多肽有20个氨基酸，其中含天门冬氨酸4个，分别位于第5、6、15、20位（见图）；肽酶X专门作用于天门冬氨酸羧基端的肽键，肽酶Y专门作用于天门冬氨酸氨基端的肽键，下列相关叙述正确的是（ ）
A．该20肽含有肽键至少有22个 B．该20肽游离的氨基和羧基各为1个和8个 C．肽酶X完全作用后产生的多肽共含有氨基酸19个 D．肽酶Y完全作用后产生的多肽中氧原子数目比20肽多了4个
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| 25. 难度：中等 | |
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图为电子显微镜视野中观察到的某细胞的一部分。下列有关该细胞的叙述中，都不正确的是 （ ）
①此细胞既可能是真核细胞也可能是原核细胞 ②此细胞是动物细胞而不可能是植物细胞 ③结构2不含磷脂 A．①② B．③ C．②③ D．①③
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| 26. 难度：中等 | |
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目前基因工程所用的质粒载体主要是以天然细菌质粒的各种元件为基础重新组建的人工质粒，pBR322质粒是较早构建的质粒载体，其主要结构如图一所示：
（1）构建人工质粒时要有抗性基因，以便于________。 （2）pBR322分子中有单个EcoRⅠ限制酶作用位点，EcoRⅠ只能识别序列—G↓AATTC—，并只能在G与A之间切割。若在某目的基因的两侧各有1个EcoRⅠ的切点，请画出目的基因两侧被限制酶EcoRⅠ切割后所形成的黏性末端。 （3）pBR322分子中另有单个的BamHⅠ限制酶作用位点，现将经BamHⅠ处理后的质粒与用另一种限制酶BglⅡ处理得到的目的基因，通过DNA连接酶作用恢复________键，成功地获得了重组质粒。说明____________。 （4）为了检测上述重组质粒是否导入原本无ampR和tetR的大肠杆菌，将大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图二的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图三的结果（空圈表示与图二对照无菌落的位置）。与图三空圈相对应的图二中的菌落表现型是____________，图三结果显示，多数大肠杆菌导入的是________________。
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| 27. 难度：中等 | |
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科学家设法将人的生长激素基因导入其他生物体（细胞）内，从而获取大量的人的生长激素，应用于侏儒症的早期治疗，如下图所示。请据图回答下列问题。
（1）过程①采用的方法是________，过程②之前需用________处理目的基因和质粒。 （2）过程③需事先对大 （3）过程⑤一般先将生长激素基因和 结合在一起，导入奶牛的________，然后进行早期胚胎培养，再进行胚胎移植，生下转基因牛犊。
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| 28. 难度：中等 | |
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下图表示在生物体外获取DNA（或目的基因）的两种方式。请据图分析回答：
（1）图一中的DNA聚合酶与人体内的DNA聚合酶相比具有________特性。 （2）图一A中的DNA解螺旋过程在人体内可由________催化完成。C过程复制方式的特点是__ （3）图二E中的碱基互补配对方式与图一C中的不同之处是________。假设图一中的一个模板DNA分子中有800个碱基对，其中含有腺嘌呤600个，若通过PCR技术共消耗周围环境中游离的胞嘧啶脱氧核苷酸6200个，则该模板DNA在PCR扩增仪中已经复制了________次。
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| 29. 难度：中等 | |
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萝卜储藏根细胞中是否存在蛋白质和DNA？某生物小组对此进行研究，他们从网上查阅资料得知：①蛋白质在10%NaCl溶液中可沉淀析出； ②在蛋白质溶液中，加入双缩脲试剂，溶液呈现特有的颜色； ③DNA溶于10%NaCl溶液，但在95%酒精中呈白色絮状沉淀析出。 实验材料：白萝卜。 实验用具：粉碎机 药品及试剂：蒸馏水、10%NaCl、95%的酒精、甲基绿染液、双缩脲试剂、蛋白质标准样品。 请你根据所提供的条件参与实验设计并完成实验。 （1）材料处理：称取50g萝卜洗净切块，加水 30 mL，粉碎机粉碎，将匀浆经 过滤 （2）提取： ①向过滤得到的滤液中加入10%NaCl溶液直至沉淀析出。经滤纸过滤，将滤纸上的沉淀物放入试管中，加入1 mL蒸馏水，振荡，用于蛋白质鉴定； ②向除去蛋白质的滤液中，加入 ，用玻璃棒轻轻搅拌，见有白色絮状沉淀产生，经滤纸过滤，用镊子将滤纸上的絮状沉淀置于载玻片上，用于DNA鉴定。 （3）鉴定及结果： ①在用于蛋白质鉴定的实验试管中，加入双缩脲试剂，产生紫色反应；同时将蛋白质标准样品和 1 mL蒸馏水放入另一试管，加入双缩脲试剂产生紫色反应，观察到两试管中颜色基本一致，说明实验试管中 ②在用于DNA鉴定的载玻片上，滴加甲基绿染液，DNA呈蓝绿色，说明该白色絮状沉淀为DNA； ③通过对白萝卜储藏根匀浆液的检测，说明 。 （4）讨论： ①蛋白质在萝卜储藏细胞中所起的作用是①是细胞膜等生物膜的结构成分，酶等功能蛋白质的组成成分，也是糊粉粒等储存蛋白质的成分。 ②DNA主要来自萝卜储藏根细胞的_________________。
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| 30. 难度：中等 | |
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细胞是生物体结构和功能的基本单位，也是进行新陈代谢的
（1）A～D图所示细胞中一定能进行光合作用的是________（填代号）。 （2）B细胞的某种分泌蛋白，在核糖体中合成之后，按照_____________（用箭头和结构名称表示）的方向运到细胞外。 （3）与B细胞相比，A细胞中特有的能产生能量的结构是[ ]________。 （4）从图中可看出，通过形成囊泡形式相互转化的生物膜是__________________。
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