| 1. 难度：中等 | |
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利用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如图所示，下列叙述正确的是（ ）
A．过程①需使用逆转录酶来自于抗农药马拉硫磷小菜蛾 B．过程②需使用解旋酶和PCR获取目的基因 C．过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备 D．过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞
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| 2. 难度：中等 | |
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下列关于基因工程的叙述，正确的是（ ） A．目的基因和受体细胞均可来自动物、植物或微生物 B．限制性核酸内切酶、DNA连接酶及载体是基因工程中常用的工具酶 C．若检测培育的抗虫棉花是否成功，可用相应的病菌侵染棉花植株 D．载体上的抗性基因有利于检测目的基因是否插入到受体细胞的染色体上
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| 3. 难度：中等 | |
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苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导人棉花细胞是否已表达，其检测方法是（ ） A．是否能检测到标记基因 B．是否有抗生素抗性 C．是否能分离到目的基因 D．是否有相应的性状
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| 4. 难度：中等 | |
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关于蛋白质工程的说法，错误的是（ ） A．蛋白质工程能定向地改造蛋白质分子的结构，使之更加符合人类需要 B．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构 C．蛋白质工程能产生自然界中不存在的新型蛋白质分子 D．蛋白质工程与基因工程密不可分，又称为第二代基因工程
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| 5. 难度：中等 | |
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下列有关基因工程中限制性内切酶的描述，错误的是（ ） A、一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 B、限制性内切酶的活性受温度影响 C、限制性内切酶能识别和切割RNA D、限制性内切酶可从原核生物中提取
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| 6. 难度：中等 | |
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限制酶是一种核酸内切酶，可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。下图为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ和BglⅡ的识别序列和切割位点：切割出来的DNA黏性末端可以互补配对的是（ ）
A．BamHⅠ和EcoRⅠ B．BamHⅠ和HindⅢ C．BamHⅠ和BglⅡ D．EcoRⅠ和HindⅢ
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| 7. 难度：中等 | |
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目的基因导入受体细胞后，是否能稳定维持和表达，只有通过鉴定和检测才能知道。下列关于目的基因检测和鉴定方法中没用到分子检测的是（ ） A．抗虫棉是否有抗虫特性 B．目的基因是否翻译蛋白质 C．目的基因是否转录mRNA D．受体细胞是否有目的基因
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| 8. 难度：中等 | |
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人们试图利用基因工程的方法，用乙种生物生产甲种生物的一种蛋白质。生产流程是：甲生物的蛋白质的mRNA目的基因与质粒DNA重组导入乙细胞获得甲生物的蛋白质。下列说法正确的是（ ） A．①过程需要的酶是逆转录酶，原料是A、U、G、C B．②要用限制性内切酶切断质粒DNA，再用DNA连接酶将目的基因与质粒连接在一起 C．如果受体细胞是动物细胞，③过程可用农杆菌转化法 D．④过程中用的原料不含有A、U、G、C
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| 9. 难度：简单 | |
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运用基因工程技术手段，从苏云金芽孢杆菌中获取抗虫基因Bt，将Bt基因转移到优质油菜中，培育出转基因抗虫的油菜品种。这一品种在生长过程中能产生特异性的杀虫物质，对菜青虫有显著的抗性，能大大减少农药的使用，保护农业生态环境。请根据以上信息分析，下列叙述中正确的是（ ） A．该抗虫基因Bt的结构是间隔的、不连续的 B．特异性的杀虫物质是某种抗体 C．基因Bt不需要逆转录酶作用就能表达 D．抗虫油菜只能通过组织培养进行无性繁殖
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| 10. 难度：中等 | |
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下列四种质粒含有El和E2两种限制酶的识别位点，Apr表示抗青霉素的抗性基因， Tcr表示抗四环素的抗性基因。若将下图所示X-1、X-2、X-3、X-4四种质粒导入大肠杆菌，然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上。在这两种培养上均能生长的大肠杆菌细胞类型是（ ）
A．含X-1的细胞 B．含X-2的细胞 C．含X-3的细胞 D．含X-4的细胞
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| 11. 难度：中等 | |
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在将目的基因导入受体细胞的相关操作中，正确的是（ ） A．导入植物细胞时均采用农杆菌转化法 B．转基因动物的获得多数运用基因枪法 C．大肠杆菌作为受体细胞时通常需要使用钙离子处理 D．导入目的基因的动物受精卵在培养液中发育成转基因动物
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| 12. 难度：中等 | |
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下列说法正确的是（ ） A．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 B．用适当的化学物质处理受体细菌表面，将重组DNA导入受体细菌 C．质粒是基因工程中惟一用作运载目的基因的运载体 D．利用运载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制的过程不能称为“克隆”
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| 13. 难度：简单 | |
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高粱由于含有磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶，在强光、高温的条件下，其利用CO2，的能力远远高于水稻。从高粱的基因组中分离出磷酸烯醇式丙酮酸装化酶基因（ppc基因），将其转入水稻体内，培育出了一批光合效率较高的转基因水稻。下列说法正确的是（ ） A．从高粱的基因组中分离出ppc基因需要限制性核酸内切酶、DNA连接酶等工具酶 B．获得的该转基因水稻都是杂合子 C．该批转基因水稻都能产生磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 D．获得的转基因水稻每个体细胞都有ppc基因，且都能产生磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶
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| 14. 难度：简单 | |
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基因治疗是指（ ） A．用专一性强的抗体消灭有基因缺陷的细胞 B．把健康的外源基因导入到有基因缺陷的细胞中 C．运用人工诱变，使缺陷基因突变为正常基因 D．将限制酶注入细胞，把细胞中有缺陷的基因切除
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| 15. 难度：中等 | |
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关于基因工程的叙述，正确的是（ ） A．基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因 B．细菌质粒是基因工程常用的运载体 C．通常用一种限制性核酸内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种限制酶处理运载体DNA D．为育成抗除草剂的农作物新品种导入的抗除草剂的基因只能以受精卵为受体
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| 16. 难度：中等 | |
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下列关于运载体的叙述中，错误的是（ ） A．与目的基因结合后，实质上就是一个重组DNA分子 B．对某种限制酶而言，最好只有一个切点，但还要有其他多种限制酶的切点 C．目前最常用的有质粒、噬菌体和动植物病毒 D．具有某些标记基因，便于对其进行切割
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| 17. 难度：中等 | |
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下列有关基因及基因工程的叙述，有几项说法是正确的是（ ） ①在基因工程中可依标记基因对工程菌进行筛选 ②终止密码是由非编码区转录而来 ③基因诊断的基本原理是DNA分子杂交 ④DNA连接酶、限制性内切酶及运载体是构建重组质粒必需的工具酶 ⑤在人工合成目的基因的过程中，根据蛋白质中氨基酸序列合成的目的基因的种类及控制的性状分别是多种和相同性状 ⑥幽门螺杆菌与硝化细菌基因编码区由外显子和内含子组成： A．二项 B．三项 C．四项 D．五项
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| 18. 难度：中等 | |
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某生物制品公司用如下方法生产干扰素。如下图所示：
据上述过程分析，叙述正确的是（ ） A．该生产方式应用了动物细胞核移植技术 B．干扰素基因是标记基因 C．酵母菌是该过程的受体细胞 D．该方法生产的干扰素特异性强
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| 19. 难度：中等 | |
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北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，正确的是（ ）
A．过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序 B．多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白 C．过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选 D．应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达
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| 20. 难度：中等 | |
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科学家利用基因工程培育出了耐盐的转基因水稻新品系。下列叙述错误的是（ ） A．如果目的基因的核苷酸序列是全部未知的，可用PCR技术得到 B．可通过农杆菌的感染以实现重组质粒导入受体细胞 C．含耐盐基因的水稻细胞可经植物组织培养 获得植株 D．可用较高浓度的盐水浇灌来鉴定 水稻植株的耐盐性
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| 21. 难度：中等 | |
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图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图，所用载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒A导入细菌B后，其上的基因能得到表达。请完成下列问题：（ ）
A．将重组质粒导入细菌B常用的方法是显微注射法 B．将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，能生长的只是导入了重组质粒的细菌 C．将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的就是导入了质粒A的细菌 D．目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长
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| 22. 难度：中等 | |
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基因表达载体的构建所需的条件有（ ） ①同一种限制酶切割目的基因和质粒 ②具有某些标记基因的质粒 ③RNA聚合酶 ④目的基因 ⑤DNA连接酶 ⑥四种脱氧核苷酸 ⑦ATP A．①②③④⑤⑥⑦ B．①②④⑤⑦ C．①②③④⑤ D．①②③④⑤⑦
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| 23. 难度：中等 | |
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基因工程操作核心是（ ） A．目的基因的获取 B．目的基因的导入 C．基因表达载体的构建 D．目的基因的检测和鉴定
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| 24. 难度：中等 | |
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科学家将含有人的胰岛素基因的DNA片段注入牛的受精卵中，该受精卵发育的牛能分泌人的胰岛素。下列对这一过程的叙述，错误的是（ ） A．如果用逆转录法人工合成人的胰岛素基因，应从人的胰岛细胞中获得相应的RNA B．人的胰岛素基因可以在牛的细胞内复制、转录和翻译 C．该牛称为“克隆牛”，其细胞内会发生RNA的复制 D．该过程定向地改造了生物的遗传性状
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| 25. 难度：中等 | |
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图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为：C↓CGG、G↓GATCC．↓GATC．CCC↓GGG。下列分析中正确的是（ ）
A．若用限制酶MspⅠ完全切割图1中DNA片段，会破坏2个磷酸二酯键 B．若图1所示DNA虚线方框内的碱基对被T－A替换，用限制酶SmaⅠ完全切割后会产生3种不同的DNA片段 C．若切割图2中的质粒以便拼接目的基因D应选择限制酶 BamHⅠ和MboⅠ D．若用上一选项中的条件构建含有目的基因D的重组质粒并成功导入细菌体内，则此细菌在添加抗生素A和B的培养基中不能存活
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| 26. 难度：简单 | |
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基因工程利用某目的基因（图甲）和Pl噬菌体载体（图乙）构建重组DNA。限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ。下列分析错误的是（ ）
A．构建重组DNA时,可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌体载体 B．构建重组DNA时,可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌体载体 C．图乙中的Pl噬菌体载体只用EcoRⅠ切割后,含有2个游离的磷酸基团 D．用EcoRⅠ切割目的基因和Pl噬菌体载体,再用DNA连接酶连接,只能产生一种重组DNA
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| 27. 难度：中等 | |
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下列关于基因工程的叙述中，正确的是（ ） ①基因工程是人工进行基因重组的技术，是在分子水平上定向改变生物的遗传物质 ②基因治疗是基因工程技术的应用 ③基因工程打破了物种与物种之间的界限 ④DNA探针可用于病毒性肝炎的诊断、遗传性疾病的诊断、改造变异的基因、检测饮用水病毒含量 A．②③④ B．①②③ C．①②④ D．①③④
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| 28. 难度：中等 | |
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下列有关将目的基因导入受体细胞的相关叙述，正确的是（ ） A．将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是花粉管通道法 B．植物的受体细胞可以是受精卵，也可以是叶肉细胞等体细胞 C．基因枪法是将目的基因导入动物细胞中最为有效的方法 D．将某种药用蛋白基因导入动物乳腺细胞中即可获得乳腺生物反应器
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| 29. 难度：中等 | |
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植物组织培养过程可以归纳为： A．从理论上讲，①可以是植物体的每一个活细胞 B．将①经脱分化培养成②时，得到胚状体或丛芽 C．②→③的再分化过程中，细胞增殖的方式为有丝分裂 D．①→③的培养过程中，应在培养基中加入水、无机盐、蔗糖、氨基酸、植物激素等
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| 30. 难度：中等 | |
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超氧化物歧化酶（SOD）是一种源于生命体的活性物质。下图为人工培育含SOD植物新品种的过程，相关叙述正确的是（ ）
A．①过程常用Ca2+处理法导入SOD基因 B．②、③过程所用的激素种类和比例都相同 C．SOD催化反应的机制是为反应提供活化能 D．图示育种过程体现了植物细胞的全能性
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| 31. 难度：中等 | |
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在以下4种细胞工程技术中，培育出的新个体中，体内遗传物质均来自一个亲本的是（ ） A．植物组织培养 B．细胞融合 C．植物体细胞杂交 D．细胞核移植
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| 32. 难度：中等 | |
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以下为植物体细胞杂交技术流程图，其中甲和乙分别表示两种二倍体植物细胞，所含有的染色体组分别是AA和BB。据图分析正确的是（ ）
A．图中①过程通常用纤维素酶和果胶酶作用，目的是获得原生质体 B．过程②只能使用聚乙二醇诱导得到杂种细胞 C．经过②和③过程形成的c细胞只有AABB这一种类型 D．该过程的目的是获得杂种细胞，优点是克服远缘杂交不亲和障碍
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| 33. 难度：中等 | |
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下列关于生物工程相关知识的叙述，正确的是（ ） A．基因工程操作为了获得重组质粒，一般用相同的限制性内切酶，露出的黏性末端相同 B．若要生产转基因抗病水稻，可将目的基因先导入到大肠杆菌中，再转入水稻细胞 C．植物体细胞杂交，能克服远源杂交不亲和的障碍，培育出的新品种可能是单倍体 D．基因治疗主要是对具有缺陷的体细胞进行全面修复
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| 34. 难度：中等 | |
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下列不需要用植物组织培养技术的是（ ） A．花药离体培养获得单倍体植株 B．基因工程培养抗虫棉植株 C．细胞工程培育“番茄-马铃薯”杂种植株 D．秋水仙素处理萌发的种子或幼苗获得多倍体植株
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| 35. 难度：中等 | |
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如图是“白菜—甘蓝”杂种植株的培育过程，下列说法正确的是（ ）
A．图示“白菜—甘蓝”植株不能结子 B．愈伤组织有叶绿体，代谢类型是自养需氧型 C．上述过程中包含着有丝分裂、减数分裂和细胞分化等过程 D．“白菜—甘蓝”杂种植株的形成是细胞全能性表达的结果
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| 36. 难度：中等 | |
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再胚状体外包裹人工种皮可获得人工种子，关于培育过程的叙述不正确的是（ ） A．人工种子一般用离体的植物细胞通过组织培养技术获得 B．胚状体是由愈伤组织分化而成的，离体细胞只有形成愈伤组织才能表现出全能性 C．同一批次的人工种子一般具有相同的基因型 D．胚状体是由未分化的、具有分裂能力的细胞构成
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| 37. 难度：中等 | |
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如图表示利用植物细胞工程对棉花进行改良的过程,据图分析错误的是（ ）
A．①过程需在适宜条件下用纤维素酶和果胶酶处理 B．②过程定向改变原生质体的遗传特性 C．③过程需要通过液体悬浮培养 D．④过程需用适宜浓度的生长调节剂处理
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| 38. 难度：中等 | |
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下列说法正确的是（ ） A．原生质体的结构是由细胞膜、液泡膜以及这两层膜之间的细胞质组成 B．用酶解法获得原生质体后，可以用观察细胞的有丝分裂实验对其活力进行检查 C．DNA连接酶能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯键，且需要模板 D．人的胰岛素基因可以插入到奶牛的染色体上，是因为它们的DNA都是有规则的双螺旋结构，而且DNA的基本组成单位相同
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| 39. 难度：中等 | |
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下图表示利用细菌中抗虫基因培育抗虫玉米的过程，其中①‐⑧表示操作步骤，a、b表示分子，c‐e表示培养过程，其中d过程表示细菌与玉米细胞混合培养。下列有关叙述正确的是（ ）
A．图中需要用到限制酶的是步骤①②④ B．图中导入目的基因的是步骤④ C．步骤⑤的主要目的是扩增目的基因 D．脱分化和再分化的步骤分别是⑦和③
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| 40. 难度：中等 | |
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用植物细胞工程技术将天竺葵与香茅草进行杂交可产生驱蚊香草，使有驱蚊作用的香茅醛随着天竺葵的蒸腾作用散发到空气中，达到驱蚊的效果。下面有关培育过程的叙述，不正确的是（ ） A．原生质体的融合常用PEG作为诱导剂 B．形成的愈伤组织其代谢类型是自养需氧型 C．由杂种细胞→杂种植株，要通过有丝分裂和细胞的分化 D．该项生物工程技术可克服远源杂交不亲和的障碍
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| 41. 难度：中等 | |
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人外周血单核细胞能合成白介素2（IL-2），该蛋白可增强机体免疫功能，但在体内易被降解。研究人员将IL-2基因与人血清白蛋白（HSA）基因拼接成一个融合基因，并在酵母菌中表达，获得具有IL-2生理功能、且不易降解的IL-2- HSA融合蛋白。其技术流程如图。请回答：
（1）图中②过程需要______________酶的参与。 （2）表达载体1中的位点__________，应为限制酶BglⅡ的识别位点，才能成功构建表达载体2。 （3）表达载体2导入酵母菌后，融合基因转录出的 mRNA中，与IL-2蛋白对应的碱基序列不能含有_______（起始、终止）密码子，才能成功表达出IL-2-HSA融合蛋白。 （4）应用_____________杂交技术可检测酵母菌是否表达出IL-2- HSA融合蛋白。
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| 42. 难度：中等 | |
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研究人员将抗虫基因（SCK基因）导入水稻培育抗虫转基因水稻，在该工程中所用的基因“剪刀”能识别的序列是—GGATCC—，切点在GG之间。同时卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下面为培育转基因水稻过程示意图，请回答：
（1）请画出质粒的切割点被切割后形成的黏性末端的示意图______________。 （2）培养基2除含有必要营养物质、激素外，还必须加入________________。 （3）某些抗虫植株体细胞含两个SCK基因，假设这两个基因在染色体上随机整合，出现如图所示三种情况。
甲图个体自交，F1中抗虫植株和非抗虫植株之间的比例为__________，乙图个体自交，子代中抗虫植株和非抗虫植株之间的比例为_________，丙图个体自交，F1中抗虫植株和非抗虫植株之间的比例为__________。
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| 43. 难度：中等 | |
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科学家用植物体细胞杂交方法，将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合，成功地培育出了“番茄－马铃薯”杂种植株，如下图，其中①～⑤表示过程，英文字母表示细胞、组织或植株。据图回答下列问题：
（1）实现过程②的技术是 。如果将已除去细胞壁的植物细胞放入等渗溶液中，细胞是何形状？ 。 （2）在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，依据的原理是________，其中过程④相当于_________过程，⑤涉及的分裂方式为______________。 （3）若番茄细胞含m条染色体，马铃薯细胞含n条染色体，则“番茄－马铃薯”细胞内含________条染色体；若杂种细胞培育成为“番茄—马铃薯”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于________倍体植株。
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| 44. 难度：中等 | |
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已知生物体内有一种蛋白质（P），该蛋白质是一种转运蛋白，由305个氨基酸组成。如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质（P1）不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活性。回答下列问题： （1）从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的________进行改造。 （2）以P基因序列为基础，获得P1基因的途径有修饰 （P、P1）基因或合成 ___（P、P1）基因，所获得的基因表达时是遵循中心法则的，中心法则的全部内容包括__________的复制；以及遗传信息在不同分子之间的流动，即： 。 （3）蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过___________和_____________，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物功能进行鉴定。
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