1978年，人类首次利用转基因技术生产出人胰岛素，其过程大致如图所示：

（1）人胰岛素由A、B两条肽链组成，可根据组成肽链的氨基酸序列，确定编码胰岛素基因的碱基序列，因此可通过____________方法获得目的基因。

（2）β- 半乳糖苷酶能将无色ONPG分解，产物呈黄色，本生产流程中β- 半乳糖苷酶基因作为___________，通过①和②，完成基因表达载体的构建，写出该过程处理DNA分子所需要的酶：________________________________。

（3）③表示将表达载体导入受体细胞，用Ca2+处理大肠杆菌，目的是使之变为____________细胞，利于外源DNA侵染，④表示利用化学方法催化二硫键的形成，合成具有生物活性的胰岛素，人体内该过程在胰岛B细胞的_________中进行。

如图表示利用胚胎干细胞（ES细胞）所做的一系列研究。过程Ⅰ是将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素。过程Ⅱ是将目的基因导入胚胎干细胞的过程。下列有关叙述不正确的是（  ）

A. 过程Ⅰ的研究利用了胚胎干细胞具有发育的全能性的特点

B. 过程Ⅰ中，囊胚的后一个阶段形成了内、中、外三个胚层及两个囊胚腔

C. 过程Ⅱ中可用显微注射法将目的基因导入胚胎干细胞

D. 过程Ⅱ中转基因小鼠大部分体细胞中无褐毛基因

科学家运用不同的生物工程技术培育具有优良性状的牛，下列说法错误的是（  ）

A. 利用核移植等技术可培育具有亲本优良性状的克隆牛

B. 利用体外受精等技术可培育出与母体遗传性状相同的试管牛

C. 动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同

D. 胚胎移植等技术可充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力

印度沙漠猫是一种珍稀猫科动物,通过胚胎工程技术,可以让家猫代孕而繁育,主要步骤如图所示。下列相关叙述正确的是(   )

A. 步骤甲、乙分别是指精子获能、胚胎分割

B. 诱导超数排卵所注射的激素只能作用于特定细胞

C. 受精卵发育成早期胚胎所需营养主要来源于培养液

D. 步骤甲使用的培养液和早期胚胎培养液成分基本相同

下列关于细胞工程的叙述，错误的是  （  ）

A. 先用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞后，再用聚乙二醇诱导两种植物细胞融合

B. 单克隆抗体制备过程中，需要进行抗体检测和克隆化培养这两次筛选过程

C. 两个二倍体植物进行有性杂交和体细胞杂交产生的子代染色体组分别是2个和4个

D. 在动物细胞工程的不同技术中，均要使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理

若高致病性禽流感病毒H5N1侵入人体后可发生如图所示的免疫反应（A、B为有关物质），下列各种分析正确的是 （  ）

A. 禽流感病毒H5N1侵入机体后，T细胞的细胞周期可能会变短

B. A物质为抗体，最终将禽流感病毒H5N1清除

C. T细胞成熟于骨髓，它可分化成记忆T细胞和效应T细胞

D. 效应T细胞与靶细胞密切接触依赖B物质，B物质的化学本质是脂质

动物细胞内低Na+ 、高K+的离子浓度对神经冲动的产生、细胞渗透平衡等生命活动具有重要作用。这种浓度差与细胞膜上的Na+ 、K+泵有关，其作用原理如图所示，下列说法不正确的是（   ）

A. Na+和K+的运输方式为主动运输

B. Na+K+泵每次运输的Na+数量多于K+

C. 在细胞培养液中加入乌苯苷会影响K+的运输

D. 该运输过程的持续会导致大量ADP的积累

生物技术已经渗入到了我们生活的方方面面,比如:

（1）哺乳动物单倍体胚胎干细胞技术是遗传学研究的新手段,该项技术为研究隐性基因功能提供了理想的细胞模型。如图表示研究人员利用小鼠获取单倍体胚胎干细胞的方法。请分析回答。

①方法一中,研究人员需对实验小鼠注射促性腺激素,使其超数排卵,从而获得更多的_______________,在体外选用特制的培养液培养至____________________期,并从_____________中分离、筛选出胚胎干细胞。采用这种方法获得的单倍体胚胎干细胞称为孤雌单倍体胚胎干细胞。

②采用方法二可获得孤雄单倍体胚胎干细胞。受精阶段,防止多精入卵的第二道屏障是_______________。研究人员用特定方法去除细胞M中的______________原核,再对处理后的细胞进行进一步的培养、分离和筛选。胚胎干细胞在功能上具有______________________的特点。

（2）在转基因或产品研究过程中,绝大多数科学家都能自觉地遵守科学研究道德,如把重组DNA的转移限制在遗传上具有____________________的生物上,如转生长激素基因鱼,受体鱼一般培育为__________（填二倍体或三倍体）。

回答下列问题：

酵母菌是一种兼性厌氧型的真菌，在工业生产中具有重要的用途。

(1)用培养基培养微生物时，除考虑各种营养条件外，还要考虑_________和渗透压等条件（至少写两个），并进行________灭菌。

(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即___________和___________。从物理状态来看，应属于___________培养基。

(3)将接种后的平板置于培养箱中培养时需倒置,原因是____________。

(4)在对酵母菌的扩大培养过程中，为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1 000倍后，经台盼蓝染液（体积忽略不计）染色，用25×16型血细胞计数板（体积为0.1mm3）计数5个中格中的细胞数，理论上_____色细胞的个数应不少于_____，才能达到每毫升4×109个活细胞的预期密度。

南极自然环境是地球仅有的人类干扰少的寒冷地带的生态系统。Crooked湖是南极的淡水湖之一，该湖的主要食物以及这些食物的营养关系如下图所示。

Crooked湖的食物营养关系示意图

请回答：

（1）该生态系统的结构包含____________。没有表示出的生态系统成分是______________。

（2）图中各营养级生物同化的能量共同的流向有__________________、______________。鞭毛藻能感受光线的强弱，借助鞭毛移动到光线合适的位置进行光合作用，由此可见，体现了生态系统的信息传递的作用是________________。

（3）与鄱阳湖相比，Crooked湖的自我调节能力______________，原因是______________。

（4）假设该湖中存在某一条食物链，那么能量在两种相邻的生物间的传递效率一定在10%-20%之间吗？为什么？_______________________________________________________