Question

生物技术的广泛应用给社会带来了较大的经济效益，受到了社会的广泛重视。请回答下列有关问题：

（1）制作泡菜时需要测定亚硝酸盐的含量，其方法是_____。亚硝酸盐在特定的条件下会转变为_____， 引起生物致癌。引起细胞癌变的原因是环境中的致癌因子使细胞中的_________发生_____。

（2）1993 年，美国科学家 K．B．Mullis 因发明了 PCR 技术而获得了诺贝尔医学与生物化学奖。PCR 技术和生物体内 DNA 的复制都必需的条件包括_____、模板 DNA、能量、游离的脱氧核苷酸和_________；在生物体内 DNA 复制所必需的，而在 PCR 技术中不需要的成分是_____。

（3）为获得一种能高效降解农药的细菌（目的菌），向培养基中加入某种化合物，将初步筛选得到的目的菌转到固体培养基中，常采用的接种方法是_____；实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后再倒掉，这样做是为了_________。

Answer

比色法 亚硝胺 原癌基因和抑癌基因 基因突变 DNA聚合酶 引物 解旋酶 平板划线法 防止造成环境污染

【解析】

1.测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测对比，可以大致估算出亚硝酸盐的含量。
2.PCR技术的条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；PCR的操作过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。
3.微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）测定泡菜中亚硝酸盐含量的方法是比色法；摄入体内的亚硝酸盐含量过多，在特定的条件下会转化成亚硝胺，亚硝胺是化学致癌因子；细胞癌变的机理是在环境中致癌因子的作用下，原癌基因和抑癌基因发生基因突变，导致细胞的分裂失控而成为癌细胞。

（2）PCR技术和生物体内DNA的复制的共同条件是：都需要DNA聚合酶、模板、原料、酶和能量及引物；生物体内DNA合成需要解旋酶，PCR技术不需要解旋酶，通过温度变化实现DNA的解聚。

（3）将初步筛选得到的目的菌转到固体培养基上的常用接种方法是平板划线法，若需要计数，则采用稀释涂布平板法，微生物的实验室培养中，为了防止培养物污染环境，实验结束后，使用过的培养基应该进行处理后再倒掉．