Question

下面是以小鼠为对象进行的研究工作，请分析回答问题。

（1）进行小鼠胚胎工程操作时，首先在光控周期下（光照14h，黑暗10h）饲养成年雌鼠，并注射促性腺激素，目的是____________________ 。然后从雌鼠输卵管中取出卵子，在一定条件下培养成熟；并从雄鼠附睾中取出精子，在一定条件下培养一段时间，目的是______________________。再在37℃，5%CO₂条件下，精卵共同作用4h，冲洗后继续培养。定时在显微镜下观察胚胎的变化，第5天后可以看到胚胎发生收缩，细胞间隙扩大，接着胚胎内部出现裂隙，这是胚胎____________ 期开始的标志。

（2）如果体外受精后，在精核与卵核融合之前，用微型吸管除雄核，再用细胞松弛素B处理（作用类似于用秋水仙素处理植物细胞），处理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是 ___________________________________________。

（3）如果将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中，由重组细胞发育成小鼠丙，则小鼠丙的基因来源于______________________________________________。

（4）如果将外源基因导入小鼠受精卵，则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠，有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因________________________________________________  。

（5）如果利用小鼠制备抗HSV-I的单克隆抗体的过程中，先给小鼠注射一种纯化的HSV-1蛋白，一段时间后，若小鼠血清中抗 ________________ 的抗体检测呈阳性，说明小鼠体内产生了______________________ 反应，再从小鼠的脾脏中获取B淋巴细胞。将该B淋巴细胞与小鼠的 ______________ 细胞融合，再经过筛选、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞，该细胞具有的特点是 _________________________。

Answer

促进排卵（或超数排卵） 使精子获能 囊胚 容易获得纯合子并缩短育种时间 小鼠甲（体细胞）核基因和小鼠乙（卵细胞）细胞质基因 外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达 HSV—1蛋白 体液免疫 骨髓瘤 无限增殖且产生专一抗体

【解析】本题以实验动物小鼠为材料，考查胚胎工程、动物细胞核移植、基因工程及单克隆抗体的制备等知识，综合性较强，但难度一般；要求考生能理解这些生物技术的原理和方法，并能分析操作过程中的一些操作细节，解释相关现象及其原因。

（1）进行小鼠胚胎工程操作时，对饲养成年雌鼠注射促性腺激素，目的是促进排卵（或超数排卵）；然后从雌鼠输卵管中取出卵子，在一定条件下培养成熟；并从雄鼠附睾中取出精子，在一定条件下培养一段时间，目的是使精子获能；再在37℃、5%CO2条件下，精卵共同作用4h，冲洗后继续培养。定时在显微镜下观察胚胎的变化，第5天后可以看到胚胎发生收缩，细胞间隙扩大，接着胚胎内部出现裂隙，即形成囊胚腔，这是胚胎囊胚期开始的标志。

（2）根据题意，细胞松弛素B处理的作用类似于秋水仙素，即能抑制纺锤体形成，是细胞内染色体数量加倍；因此如果体外受精后，在精核与卵核融合之前，用微型吸管除雄核，再用细胞松弛素B处理，则处理后的受精卵发育成的小鼠是纯合子；因此这种方法在动物新品种选育中的显著优点是容易获得纯合子并缩短育种时间。

（3）如果将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中，由重组细胞发育成小鼠丙，则小鼠丙的基因来源于小鼠甲（体细胞）核基因和小鼠乙（卵细胞）细胞质基因。

（4）如果将外源基因导入小鼠受精卵，则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠，有的却死亡；则因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因是外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达。

（5）如果利用小鼠制备抗HSV-I的单克隆抗体的过程中，先给小鼠注射一种纯化的HSV-1蛋白（对小鼠来说是一种抗原），一段时间后，若小鼠血清中抗HSV—1蛋白的抗体检测呈阳性，则说明小鼠体内产生了体液免疫反应；再从小鼠的脾脏中获取B淋巴细胞，将该B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合，再经过筛选、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞，该细胞具有的特点是无限增殖且产生专一抗体。