Question

农业科技工作者在烟草中找到一种抗病基因，现拟采用基因工程技术将该基因转入棉细胞中，培育抗病棉品系。请回答下列问题。

（1）要获得该抗病基因，可采用从基因文库中获取、_______________ 等方法。将抗病基因转入棉细胞时，最常用的运载体是__________。

（2）若运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如图示：

则能与该运载体连接的抗病基因分子末端是（____）

（3）切割完成后，需用_____ 酶将运载体与该抗病基因连接，得到_______分子。

（4）将抗病基因转入棉细胞时，可先将重组DNA分子导入农杆菌______ 的T-DNA上，再用该农杆菌去侵染______，从培养得到的植株中筛选获得抗病棉。

（5）这种方法比较经济和有效，称作______法。除此之外，还有基因枪法和_______法等。

（6）将含抗病基因的棉细胞培养得到完整抗病棉还需用____________ 技术。

Answer

化学方法（人工合成PCR扩增） 质粒 A DNA连接 重组DNA Ti质粒 棉细胞 农杆菌转化 花粉管通道法 植物组织培养

【解析】本题考查基因工程，要求考生理解基因工程的原理和操作程序，掌握将目的基因导入植物细胞的方法，明确基因工程在植物育种上的应用。

（1）根据题意，要获得该抗病基因，可采用从基因文库中获取、化学方法（人工合成PCR扩增）等方法。植物基因工程中将抗病基因转入棉细胞时，最常用的运载体是质粒。

（2）基因工程中，将目的基因与运载体结合需要使用DNA连接酶，遵循碱基互补配对原则，将互补的黏性末端连接起来，分析EcoRⅠ切割后产生的片段可知，其黏性末端的碱基序列可以和A选项的黏性末端进行连接。

（3）基因工程中，可利用DNA连接酶将运载体目的基因基因连接，得到重组DNA分子。

（4）将抗病基因转入棉细胞时，可先将重组DNA分子导入农杆菌Ti质粒的T-DNA上，再用该农杆菌去侵染棉细胞，从培养得到的植株中筛选获得抗病棉。

（5）利用农杆菌Ti质粒将目的基因转入植物细胞的方法叫农杆菌转化法，除此之外，将目的基因导入植物细胞的方法还有基因枪法和花粉管通道法等。

（6）将含抗病基因的棉细胞培养成完整抗病棉利用的是植物组织培养技术。

【点睛】易错知识点拨：

1）基因工程中目的基因获取的方法有人工合成法和直接提取法，直接提取法可以从基因文库中提取，也可以用PCR扩增仪扩增目的基因。

2）将目的基因导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法，其原因是农杆菌的质粒中含有T-DNA，能携带目的基因整合到植物细胞内的染色体DNA中，随染色体DNA的复制而复制。

3）基因工程中，目的基因成功导入植物细胞后，还要利用植物组织培养技术将含有目的基因的植物细胞培育成转基因植株，因此植物组织培养技术可用于植物基因工程。