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在人源化单克隆抗体研制成功之前,单克隆抗体大都来自鼠源。但鼠源单抗在人体内使用时...

在人源化单克隆抗体研制成功之前,单克隆抗体大都来自鼠源。但鼠源单抗在人体内使用时,会产生较强的免疫原性,为解决这一问题,发明了嵌合抗体。大致过程如图所示:

(1)图示中获得“肿瘤抗原免疫小鼠”的操作是__________________________________。鼠源单克隆抗体的生产应用的动物细胞工程技术有____________________________

(2)嵌合抗体能降低鼠源抗体的“免疫原性”,从图中可以推测,免疫原性的产生主要与抗体的_________(选填“V区”、“C区”)有关。

(3)基因嵌合表达载体转染细胞的方法是_________________,转染成功的细胞具有的特点是:能分泌抗体和__________能力。

(4)嵌合抗体的生产属于________工程范畴。图示中的嵌合抗体能比较有效的治疗________

 

给小鼠注射肿瘤抗原 动物细胞培养和动物细胞融合 C区 显微注射法 无限增殖 蛋白质 肿瘤 【解析】分析:在制备过程中需要将抗原首先注入生物体内,是其产生具有免疫能力的B淋巴细胞,再用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合,并筛选出能大量增殖和产生特异性抗体的杂交瘤细胞,最后经过体外或体内培养,获取单克隆抗体。 (1)图示中获得“肿瘤抗原免疫小鼠”的操作是给小鼠注射肿瘤抗原。鼠源单克隆抗体的生产应用的动物细胞工程技术有动物细胞培养和动物细胞融合。 (2)据图可知,免疫原性的产生主要与抗体的 C区有关。 (3)把目的基因导入受精卵常用显微注射法。基因嵌合表达载兼具有淋巴细胞和体细胞的特点,体转染成功的细胞应该具有的特点是:分泌抗体和无限增殖能力。 (4)嵌合抗体的生产属于蛋白质工程范畴,图示中的嵌合抗体具有特异性,能比较有效的治疗肿瘤。  
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考点分析:
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白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将人白细胞介素的基因导入到酵母细胞中,使其分泌出有活性的白细胞介素。

(1)为增加白细胞介素基因的数量,可使用_____________________技术,但前提是必须知道基因的已知序列,目的是__________________________________________

(2)在重组载体导入酵母菌细胞之前,需用_____________________处理酵母菌,白细胞介素基因进入酵母菌细胞内,并且在其细胞内维持稳定和表达的过程,称为_____________________。在表达过程中,启动子需与_____________________识别和结合,从而驱动转录过程。

(3)在体液免疫过程中,白细胞介素是由_____________________细胞分泌的,为了能成功表达出白细胞介素,不使用细菌,而使用酵母细胞作为受体细胞,可能原因是_____________________

(4)在分泌型表达载体和白细胞介素基因所在的DNA分子上均有多个限制酶的酶切位点,图示过程获得有效表达的重组栽体使用了EcoRl和EcoR52两种限制酶,比使用单一的限制酶,其优点是__________________________________________

 

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华蟾素注射液是将蟾蜍的全皮阴干后,提炼而成的中药复方制剂,是我国经典抗肿瘤药物。研究人员为探寻华蟾素注射液抗肝癌HepG-2细胞的作用机理,进行了一系列实验。请根据题中信息回答下列问题。

Ⅰ.肝癌HepG-2细胞的培养:

(1)培养肝癌HepG-2细胞时,在培养基中加入适量的__________以补充合成培养基中缺乏的物质,为防止培养过程发生污染要加入______。此外,每48h更换1次培养液,目的是__________。同时还要提供适宜的温度、______、氧气和二氧化碳等环境条件。

Ⅱ.探究华蟾素药效作用机理的实验:

(2)用不同浓度的华蟾素注射液分别处理HepG-2细胞12h、24h和48h,测定华蟾素注射液对HepG-2细胞增殖的影响,结果如下图。

由图甲可知,华蟾素能有效地______肝癌HepG-2细胞增殖,且与______呈正相关。图乙的结果进一步表明,华蟾素对肝癌HepG-2细胞增殖的影响体现在______________

(3)DNA拓扑异构酶Ⅱ(简称TopoⅡ)为真核生物所必需,在DNA复制、转录、重组及形成正确的染色体结构、染色体分离、浓缩等方面发挥重要作用,TopoⅡ在肿瘤细胞中含量明显高于正常细胞。华蟾素注射液处理HepG-2细胞48h后,采用RT-PCR技术检测TopoⅡ基因的表达情况,结果如图丙。

①RT-PCR即逆转录-聚合酶链反应。其主要原理是:提取HepG-2细胞中的总RNA, 以一段_______作为引物,在________酶的作用下合成cDNA,再以cDNA为模板进行_________

②由图丙可知,华蟾素注射液在基因水平上影响肝癌HepG-2细胞的机理是______

 

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下图为某生物工程操作流程模式图,下列说法正确的是

A. 若此图表示基因工程的操作流程,若A为质粒,则B表示重组DNA分子

B. 若此图表示动物细胞融合过程,则形成C(杂种细胞)的原理是细胞全能性

C. 若此图为试管婴儿的培育过程,则应包括体外受精、细胞培养和胚胎移植等方面

D. 若此图为试管牛生产的技术流程图,则获得A(精子)后可直接与B进行体外受精

 

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科学家运用不同的生物工程技术培育具有优良性状的牛,下列说法错误的是(  )

A. 利用核移植等技术可培育具有亲本优良性状的克隆牛

B. 体外受精等技术可培育出与母本遗传性状完全相同的试管牛

C. 动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同

D. 胚胎移植等技术可充分发挥优良雌性个体的繁殖潜力

 

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下图表示抗人体胃癌细胞的单克隆抗体的制备过程,下列有关叙述错误的是

A. 图中甲可能是人体胃癌细胞的特异性抗原

B. 用特定的选择培养基对乙筛选,融合细胞均能生长,未融合细胞均不能生长

C. 丙、丁分别表示杂交瘤细胞和能分泌抗胃癌抗体的杂交瘤细胞

D. 丁的大规模培养可以在培养基中进行,也可以在小鼠腹腔内进行

 

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