Question

某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为正常肝细胞，乙细胞为肝肿瘤细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：

（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量_____________。

（2）在两种细胞生长过程中，当甲细胞铺满瓶壁时，其生长_____________。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更_____________。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用_____________消化处理。

（3）已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对乙细胞生长的影响，可将乙细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入_____________，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的_____________或 _____________合成水平的差异，确定Y的药效。

Answer

少 停止 少 胰蛋白酶 Y药物 mRNA 蛋白质

【解析】试题分析：本题以药物试验为背景，考查癌细胞的主要特征、动物细胞培养、探究实验，要求考生识记动物细胞培养的过程及动物细胞培养的条件；识记癌细胞的主要特征；明确实验的目的，理解实验的原则，能结合转录和翻译的过程答题。动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。

（1）肝肿瘤细胞乙比正常肝细胞甲的分裂能力强，细胞周期短，因此在其他条件相同时，相同时间内肝肿瘤细胞产生的子代细胞多，因此观察到甲细胞数量比乙细胞数量少。

（3）乙细胞为肿瘤细胞，已经失去接触，而甲细胞为正常肝细胞，存在接触抑制，因此在这两种细胞生长过程中，当甲细胞铺满瓶壁时，其生长停止，乙细胞能无限增殖，因此甲细胞传代的次数比乙细胞更少。胰蛋白酶能消化组织细胞间的蛋白质，使组织细胞分散成单个细胞。

（4）该实验的目的是试验一种抗肿瘤药物Y对乙细胞生长的影响，因此自变量为是否加入Y，B组细胞培养液中加入等量无菌生理盐水，则A组细胞培养液中应加入等量Y。已知基因X表达与肝肿瘤的发生密切相关，而基因X的表达包括转录和翻译两个步骤，抗癌药物Y的作用可能是抑制基因X的转录过程，也可能是抑制其翻译过程，因此通过分别检测基因X在A、B两组细胞中的mRNA或相关蛋白质合成水平的差异，可以确定Y的药效。