Question

某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到Amp^r或Tet^r中会导致相应的基因失活（Amp^r表示氨苄青霉素抗性基因，Tet^r表示四环素抗性基因）。有人将此质粒载体用BamHI酶切后，与用BamHI酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌，结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题：

（1）基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自于_____________

（2）质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有______________（答出两点即可）。

（3）如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在培养基上能生长的细胞是______________和______________的细胞。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有是_____________的固体培养基。

Answer

受体细胞 能自我复制、具有标记基因、具有一至多个限制酶切位点 含有质粒载体 含插入了目的基因的重组质粒 四环素

【解析】试题分析：本题考查了基因工程的有关知识，解题关键能够识记质粒作为运载体的条件，掌握目的基因检测和鉴定的方法，再结合题干信息，就能准确答题。

（1）噬菌体属于病毒，病毒没有细胞结构，其DNA复制所需的原料来自于受体细胞。

（2）质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有具有标记基因、具有一个或多个限制酶切点、能在受体细胞中复制并稳定保存。

(3) 含有质粒载体的大肠杆菌和含插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的细胞由于均含有氨苄青霉素抗性基因，在含有氨苄青霉素的培养基上都能生长。若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有四环素的固体培养基，即含有重组质粒的大肠杆菌在其中不能生长，而含有普通质粒的大肠杆菌能生长。