Question

肥胖已经严重危害人类健康。为研究发酵大麦提取物对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响，科研人员进行了相关实验。

（1）3T3-L1前脂肪细胞在胰岛素（INS）、地塞米松（DEX）和3-异丁基-1-甲基-黄嘌呤（IBMX）的诱导下，基因___________表达，分化为成熟脂肪细胞，因此经过三种物质诱导的3T3-L1前脂肪细胞是肥胖研究常用的细胞模型。

（2）3T3-L1前脂肪细胞培养液中除了具有基本的营养外，还需加入一定量的___________，并置于_______________ 中培养。

（3）将一定数目的植物乳杆菌接种到经过_________处理的粉碎过筛大麦和水的混合液中，制备发酵大麦提取物（LFBE）。除不接种植物乳杆菌外，其余操作方法相同，制备未发酵大麦提取物（RBE）。

（4）研究发酵大麦提取物对细胞分化的影响，实验处理及结果如下。（表格中+表示加入了该物质，-表示未加入）

①表格处理方法1、2、3分别是_____________、_____________、 ________________。

②分析实验结果，说明__________________________________________________。

（5）为进一步研究LFBE抑制3T3-L1前脂肪细胞分化的机理，科研人员提取各组细胞中总RNA，经___________过程获得cDNA，再利用PCR技术扩增出肥胖相关基因。在相同条件下，PCR产物的量可以间接反映细胞中 __________________的含量。若检测结果是______________，则说明LFBE抑制相关基因转录从而抑制3T3-L1前脂肪细胞分化。

Answer

选择性 动物血清（可换成抗生素以防止污染） CO2（恒温）培养箱 （高压蒸汽）灭菌 地塞米松和3-异丁基-1-甲基-黄嘌呤 未发酵大麦提取物 发酵大麦提取物 发酵大麦提取物明显抑制3T3-L1前脂肪细胞分化且随浓度增加，抑制能力加强 逆转录 【答题空10】肥胖相关基因mRNA LFBE组肥胖相关基因mRNA数量明显低于模型组和RBE组，高于空白组

【解析】试题分析：本题以柱形图和曲线图为载体，考查发酵大麦提取物对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响的相关实验探究，识记细胞分化的实质，结合对照实验的原则，以及对柱形图中的实验结果进行分析，从而得出相应实验结论。

（1）细胞分化是基因选择性表达的结果。

（2）细胞培养液中除了具有基本的营养外，还需加入一定量的动物血清（可换成抗生素以防止污染），并置于 CO2（恒温）培养箱中培养。

（3）大麦和水的混合液是用来培养植物乳杆菌的培养基，在接种之前，培养基需要灭菌，常用高压蒸汽灭菌法。

（4）①本实验是研究发酵大麦提取物对细胞分化的影响，根据题（1）中“3T3﹣L1前脂肪细胞在胰岛素（INS）、地塞米松（DEX）和3﹣异丁基﹣1﹣甲基﹣黄嘌呤（IBMX）的诱导下，分化为成熟脂肪细胞”题（3）中“植物乳杆菌接种到粉碎过筛大麦和水的混合液中，制备发酵大麦提取物（LFBE）”等相关信息可推知，表格处理方法1、2、3分别是INS．DEX．IBMX、RBE、LFBE。

②根据柱形图，分析实验结果，说明LFBE明显抑制3T3﹣L1前脂肪细胞分化率且随浓度增加，抑制能力加强。

（5）RNA经逆转录过程获得cDNA．PCR产物的量可以间接反映细胞中肥胖相关基因mRNA的含量．若检测结果是 LFBE组肥胖相关基因mRNA数量明显低于模型组和RBE组，高于空白组，则说明LFBE抑制相关基因转录从而抑制3T3﹣L1前脂肪细胞分化。