Question

人内皮抑制素（HES）是血管形成抑制因子，具有抗肿瘤的作用，可在转HES基因母羊的羊乳中获得。图13表示含有HES基因的DNA片段，图14表示pZHZ11质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、EcoRⅠ、SmaⅠ4种限制酶识别的碱基序列和切割位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、G↓AATTC、CCC↓GGG。

将重组质粒导入受体细胞，采用体细胞克隆技术获得转HES基因绵羊，技术流程如图15所示。

1.HES基因的获得可以从人的胎盘细胞中提取____________，通过逆转录方法合成含HES基因的DNA片段。若将HES基因和图中的质粒连接形成重组质粒，那么应选用_____________限制酶切割，而后加入__________酶连接。

2.该技术流程中，重组质粒的受体细胞是______________，所涉及的生物工程技术有_______________（填编号）。

①动物细胞培养技术    ②细胞核移植技术    ③干细胞技术    ④转基因技术

⑤动物细胞融合技术

3.若在母羊D的羊乳中检测到__________，说明目的基因成功表达。

4.为深入研究HES的作用机制，需要用杂交瘤技术来获得单克隆抗体。单克隆抗体制备的依据是_________

A. B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖

B. B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产生抗体

C. 骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体

D. 骨髓瘤细胞既可以产生抗体，又能无限增殖

5.若将图15中早期胚胎中的干细胞在一定条件下，诱导分化形成的组织器官移植给图中母羊_________（填“A.     B. C或D”，则不会发生免疫排斥反应。

Answer

1.mRNABamHⅠDNA连接

2.成纤维细胞①②④

3.HES

4.AC

5.AD

【解析】本题考查基因工程、细胞工程、胚胎工程，考查对基因工程、细胞工程、胚胎工程操作流程的理解与识记。

1.从人的胎盘细胞中提取mRNA，通过逆转录方法合成含HES基因的DNA片段。BamHⅠ可以从供体DNA中切取目的基因，并切割质粒，DNA连接酶可以将HES基因和图中的质粒连接形成重组质粒。

2.据图可知，重组质粒的受体细胞是成纤维细胞，整个技术流程涉及动物细胞培养技术、细胞核移植技术、转基因技术。

⑤动物细胞融合技术

3.在母羊D的羊乳中检测到人内皮抑制素（HES），说明目的基因成功表达。

4.单克隆抗体制备的依据是B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖；骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体。

5.早期胚胎的遗传物质主要来自于母羊A，将来发育成母羊D，早期胚胎中的干细胞分化形成的组织器官移植给A、D，不会发生免疫排斥反应。

【点睛】本题第(2)小题答案容易填成“受精卵”，错误原因是思维定式，认为培育转基因动物，受体细胞一定是受精卵，而忽略了题干信息。