Question

【生物——选修1：生物技术实践】

胡萝卜素作为一种重要的天然色素在人们的日常生活中有着广泛的应用，在胡萝卜素的多种生产方式中，使用三孢布拉氏霉菌进行发酵生产的方法，以及产品的高纯度、无毒副作用及绿色环保等优点受到人们的广泛重视。请回答下列问题：

（1）用平板划线法纯化三孢布拉氏霉菌，通常使用的划线工具是___________，其灭菌方法是___________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断的长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有_________________________________。

（2）常用___________法进行活菌计数，但统计的菌落数往往比活菌实际数目低。

（3）不同的材料选用的提取方法不同，根据胡萝卜素具有______________的特点。常用______________法提取胡萝卜素。提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和______________以防止胡萝卜素分解。

（4）提取的胡萝卜素样品通过_____________法进行鉴定，确定是否提取到胡萝卜素。

Answer

接种环 灼烧灭菌 接种环灼烧后未冷却或划线未从第一区域末端开始（答对一个即得分） 稀释涂布平板法 易溶于有机溶剂 萃取 时间 纸层析法

【解析】试题分析：胡萝卜素的提取：①胡萝卜素的性质：胡萝卜素是橘黄色结晶，化学性质比较稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂。②胡萝卜素的提取来源：提取天然胡萝卜素的方法主要有：一是从植物中提取；二是从大面积养殖的岩藻中获得；三是利用微生物的发酵生产。③萃取剂：最适宜作胡萝卜素萃取剂的是石油醚。④实验流程：胡萝卜→粉碎→干燥→萃取（石油醚）→过滤_→浓缩→胡萝卜素→鉴定（纸层析法）。

（1）用平板划线法纯化三孢布拉氏霉菌，通常使用的划线工具是接种环，金属用具的灭菌方法一般采用灼烧灭菌。接种环灼烧后未冷却或划线未从第一区域末端开始，可能导致划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断的长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。

（2）常用稀释涂布平板法法进行活菌计数，但统计的菌落数往往比活菌实际数目低。

（3）不同的材料选用的提取方法不同，根据胡萝卜素具有易溶于有机溶剂的特点；常用萃取法提取胡萝卜素。提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和时间以防止胡萝卜素分解。

（4）提取的胡萝卜素样品通过纸层析法法进行鉴定，确定是否提取到胡萝卜素。

【点睛】解答本题的关键是掌握平板划线操作过程中的注意事项，如①第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌；②灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种；③划线时最后一区域不要与第一区域相连；④划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。