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已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原。疫苗的生产和...

已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原。疫苗的生产和抗体的制备流程如下图所示。请回答下列问题:

(1)过程①代表的是____________,过程③构建A基因重组载体时,启动子和终止子是重新构建的,它们应该能被受体细胞的__________所识别,以便于其催化转录过程。

(2)上图为A基因的结构示意图,已知Ⅱ区的碱基数是2 000个,其中阴影区域碱基数是800个,空白区域中GC的总数共有400个,则由该区域能指导蛋白质合成的片段转录产生的mRNAAU总数是________个。

(3)在给小鼠皮下注射A蛋白时,要重复注射几次的目的是通过二次免疫,增加小鼠体内的______________数目。

(4)在将X进行扩大培养前,至少需要经过2次筛选,第一次是将____________________筛选出来,第二次是将____________________________筛选出来。

(5)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用图中基因工程生产的__________来制备疫苗。对该传染病疑似患者确诊时,可以从疑似患者体内分离出病毒与已知病毒进行核酸序列比较,或用图中的__________________与分离出的病毒进行特异性检测。

 

逆转录 RNA聚合酶 400 浆细胞 杂交瘤细胞 能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 A蛋白 抗A蛋白的单克隆抗体 【解析】试题分析:梳理基因工程的基本操作步骤、动物细胞融合技术、单克隆抗体、基因的结构及其转录等知识并形成知识网络。在此基础上,结合题意进行相关试题的解答。 (1)过程①表示以RNA为模板合成DNA的逆转录过程。 启动子位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,驱动基因转录出mRNA;终止子位于基因的尾端,具有终止转录的作用。因此过程③构建A基因重组载体时,重新构建的启动子和终止子都应该能被受体细胞的RNA聚合酶识别。 (2) 依题意可知:A基因中能指导蛋白质合成的片段即空白区域共含有2000-800=1200个碱基,其中C+G=400个,A+T=1200-400=800个。依碱基互补配对原则,每条链上所对应的该片段中A+T=400个。因mRNA是由该区域的一条链为模板,按照碱基互补配对原则,通过转录产生,所以由该区域转录产生的mRNA中A和U总数是400个。 (3) A蛋白为主要抗原。给小鼠皮下反复注射A蛋白的目的是增强小鼠的免疫能力,使机体产生较多的浆细胞。 (4) 在制备单克隆抗体的过程中,需要两次筛选。第一次是利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞;第二次是利用专一抗体阳性检测筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。 (5)在预防接种时,可以利用A蛋白作为抗原制备疫苗;或者从疑似患者体内分离出病毒,与已知病毒进行核酸序列比较;或用图中的抗A蛋白的单克隆抗体进行特异性结合检测。 【点睛】本题结合“疫苗的生产和抗体的制备流程图” 综合考查学生对基因工程和细胞工程的相关知识的识记和理解能力,准确判断图中各过程的名称是解答此题的关键。①为逆转录,②为获取目的基因,③是基因表达载体的构建,④是将目的基因导入受体细胞,⑤是从小鼠皮下获取已经免疫的B细胞,⑥为B细胞的增殖分化,⑦是细胞融合,X 为杂交瘤细胞。  
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考点分析:
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科学家利用细胞工程培育了“白菜—甘蓝”杂种植株,如图所示,请据图回答下列问题。

(1)AB的名称是_______________。由D形成F过程所依据的原理是______________,从本质上讲,“白菜—甘蓝”杂种植株具有的性状是__________________的结果。

(2)若“白菜—甘蓝”杂种植株为四倍体,则该植株的花粉经离体培养得到的植株是______倍体。

(3)“白菜—甘蓝”杂种植株的食用部分是叶,但叶又易受昆虫危害而影响产量,科学家又利用基因工程培育出带有抗虫基因的“白菜—甘蓝”植株,请你设计实验,检测此植株的抗虫基因是否表达。

①取昆虫幼虫放到带有抗虫基因的“白菜—甘蓝”植株甲上,再取等量生活状态基本一致的昆虫幼虫放在______________________________植株乙上。

②适宜条件下培养一段时间后,分别观察_____________________的生活情况。

③若___________________________________________________________,说明甲植株的抗虫基因未得到表达。

 

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下图1为某种常用质粒的序列图,Lac Z基因编码的酶能使无色的X—gal变为蓝色,Ampr为氨苄青霉素抗性基因。图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列。请回答下列问题:

(1)若要筛选成功导入目的基因的重组质粒,培养基中应加入的物质有________,构建重组质粒时需要的工具酶有_______________,对获取的目的基因可用____________技术对其扩增。 

(2)实验小组用BamH IBgl II两种限制酶切割目的基因和质粒,构建重组质粒后导入大肠杆菌中,在筛选重组质粒的培养基上,若大肠杆菌菌落显蓝色,说明导入了_____________。没有导入任何外源DNA的大肠杆菌_____________(填“能”或“不能”)在该培养基上生存。 

(3)若质粒和目的基因用BamH IBgl II两种限制酶切割后,用DNA连接酶相连,然后再用BamH IEcoR I切割成功连接后的重组质粒,可获得长度不同的_____________DNA片段。(假定每一种限制酶都充分切割。)

 

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下列有关细胞工程的叙述,正确的是    

APEG是促细胞融合剂,可直接诱导植物细胞融合

B用原生质体制备人工种子,要防止细胞破裂

C骨髓瘤细胞经免疫处理,可直接获得单克隆抗体

D核移植克隆的动物,其线粒体DNA来自供卵母体

 

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下列关于基因工程技术的叙述,正确的是

A. 切割质粒的限制酶能特异性识别的序列均由6个核苷酸组成

B. PCR反应中两种引物的碱基间互补配对以保证与模板链的正常结合

C. 载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因

D. 目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制

 

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下列关于植物组织培养和动物克隆的说法错误的是(     )

A. 植物组培获得的试管苗,可能是杂合子也可能是纯合子,可能为单倍体也可能为二倍体、多倍体

B. 为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的干扰素

C. 克隆动物的技术基础是动物细胞培养

D. 同一株绿色开花植物不同部位的细胞经组培获得的愈伤组织基因型不一定相同

 

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