Question

某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如图所示。请分析回答下列问题：

(1)培养基中加入化合物A的目的是________________，这种培养基属于__________培养基。

(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的____________。实验需要振荡几次进行培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是__________。

(3)转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，在进行下一区域划线前要将接种环____________________。

(4)研究人员统计污水池中“目的菌”的总数，选用10^－4、10^－5、10^－6稀释液进行涂布平板，每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是_____________________，此对照实验的目的是______________________________。

(5)研究人员采用平板划线法纯化水样中分离出的细菌。操作时，在第二次及以后的划线，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是________________________________。

划线的某个平板培养后，第一划线区域的平行线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域所划的第一条平行线上无菌落，其他平行线上有菌落。造成第一条平行线无菌落可能的操作失误有_____________________。

(6)在示意图A和图B中，________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。

Answer

筛选目的菌 选择 化合物A 异养需氧型 灼烧并冷却 不接种的空白培养基 检验培养基制备过程中是否被杂菌污染 将聚集的菌种逐步稀释以便获得单个菌落 接种环灼烧后未冷却，划线未从第一划线区域末端开始 B

【解析】试题分析：阅读题干和题图可知，本题是利用微生物培养的知识分离高效降解化合物A的细菌，先分析题图了解分离高效降解化合物A的细菌的过程，然后根据问题的具体内容梳理相关知识点分析解答，图A是平板划线法，图B是稀释涂布平板法。

（1）培养基中加入化合物A是为分解化合物A的微生物提供碳源和氮源，分离出能分解化合物A的微生物；这中培养基从功能上分属于选择培养基。（2）分析培养基的配方可知，该培养基由化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制而成，因此化合物A为目的菌提供了碳源和氮源；目的菌是需氧微生物，因此在培养过程中应该震荡培养，增加培养液中的溶氧量满足微生物对氧气的需求。

（3）平板划线操作的工具是接种环，对于接种环的灭菌方法应该是灼烧灭菌。

（4）实验设计过程应遵循对照原则，该实验还应增设一组不接种的空白培养基作为对照，以证明培养基制备是否被杂菌污染。

（5）对接种环常用的灭菌方法是灼烧灭菌；在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线的目的是：将聚集的菌体逐渐稀释分散以便获得由单个细胞繁殖而来的菌落。接种环在使用前和每一次划线后要进行灼烧灭菌，造成划线无菌落可能的操作失误可能是：接种环灼烧后未冷却而烫死菌种或划线未从第一区域末端开始。

（6）分析题图可知，A培养皿采用的接种方法是平板划线法，B培养皿采用的接种方法是稀释涂布平板法。