Question

萌发的禾谷类种子中淀粉酶活性较强，主要有α—淀粉酶和β—淀粉酶。α—淀粉酶不耐酸、较耐热，在pH为3．6以下迅速失活，而β—淀粉酶不耐热，在70℃条件下15 min后失活。

实验材料：萌发3天的小麦种子（芽长约1 cm）。

主要试剂及仪器：麦芽糖标准液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅等。

实验步骤：

步骤一：制作麦芽糖梯度液。取7支干净的具塞刻度试管，编号，按表加入试剂，再将试管置于60℃水浴中加热2 min，取出后按试管号顺序排列。

试剂	试管号
1	2	3	4	5	6	7
麦芽糖标准液（mL）	0	0．2	0．6	1．0	1．4	1．6	2．0
蒸馏水（mL）	2．0	1．8	1．4	1．0	X	Y	0
斐林试剂（mL）	2．0	2．0	2．0	2．0	2．0	2．0	2．0

步骤二：利用萌发3天的小麦种子制备淀粉酶溶液。

步骤三：将装有淀粉酶溶液的试管置于70℃水浴中15 min，取出后迅速冷却。

步骤四：另取四支试管，编号A、B、C、D，向A、B试管中各加5mL5%淀粉溶液，向C、D试管中分别加入2 mL已经处理的酶溶液（忽略其中含有的少量麦芽糖）和蒸馏水，将四支试管置于40℃恒温水浴中保温10 min，然后将C、D试管中的溶液分别加入到A、B试管中，摇匀后继续在40℃恒温水浴中保温10 min。

步骤五：取A、B试管中反应溶液各2 mL分别加入E、F试管，然后向E、F试管分别加入2ml斐林试剂，          ，观察颜色变化。

结果分析：将E试管中颜色与步骤一中获得的麦芽糖标准液进行比较，获得该试管中麦芽糖浓度，并计算出α—淀粉酶催化效率。

请分析回答：

（1）本实验的目的是测定                 。

（2）步骤一的5～7试管中加入蒸馏水的量（X、Y）分别是       、        （单位mL）。

（3）实验中B试管所起的具体作用是                    。

（4）请补全步骤五的做法                        。

Answer

（1）小麦种子中α-淀粉酶催化效率

（2）0．6 0．4 （3）检测实验使用的淀粉溶液中是否存在还原糖

（4）60℃ 水浴加热2min

【解析】（1）β-淀粉酶不耐热，在70℃条件下15min后失活，而本实验的步骤三中，将装有淀粉酶溶液的试管置于70℃水浴中15min，这样β-淀粉酶已经失活，但α-淀粉酶较耐热，仍具有生物活性，所以本实验的目的是测定小麦种子中α-淀粉酶催化效率．

（2）实验设计要遵循单一变量原则，所以为了保证各试管中试剂量相等，步骤一的5～7试管中加入蒸馏水的量分别是0．6、0．4、0。

（3）斐林试剂能与还原糖溶液产生砖红色沉淀，所以实验中B试管所起的具体作用是检测使用的淀粉液中是否有还原糖．

（4）根据图表可知，向E、F试管分别加入的是2mL斐林试剂，并在60℃水浴条件下加热2min．

【考点定位】探究影响酶活性的因素；检测还原糖的实验

【名师点睛】分析表格：实验设计要遵循单一变量原则，1～4号中溶液总量为4ml，为了保证各试管中试剂量相等，表中X应为0．6ml、Y应为0．4ml、Z应为0ml．淀粉酶能将淀粉水解成还原糖，而还原糖可以用斐林试剂进行鉴定．淀粉溶液中可能含有少量的还原糖，因此实验中B试管得作用是检测实验使用的淀粉溶液中是否存在还原糖．