Question

（2010•浙江）在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是（  ）

A．用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸

B．用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体

C．将重组DNA分子导入烟草原生质体

D．用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞

Answer

A

【解析】限制性核酸内切酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定．

【解析】
A、限制性核酸内切酶只能切割特定的脱氧核苷酸序列，而烟草花叶病毒的核酸是核糖核苷酸，A错误；

B、构建基因表达载体时，需要用限制酶切割得到抗除草剂基因和切开载体，再用DNA连接酶将两者连接形成重组DNA，B正确；

C、基因表达载体构建好之后，需要将重组DNA分子导入受体细胞（烟草原生质体），C正确；

D、基因工程的最后一步是目的基因的检测和鉴定，可以用含有除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞，D正确．

故选：A．

【点评】本题考查基因工程相关知识，包括基因工程的工具、操作步骤等知识点，相关内容不仅需要考生识记，还需要考生理解，特别是A选项，要求考生掌握限制酶的特点，明确限制酶只能切割特定的脱氧核苷酸序列，不能切割核糖核苷酸序列．