Question

不能用于人工诱导原生质体融合的方法是

A．振动     B．电刺激        C．PEG       D．重压

Answer

D

【解析】

试题分析：原生质体是除去细胞壁的植物细胞，它实际上就是植物细胞的原生质部分。当进行植物体细胞杂交时，先用纤维素酶、果胶酶除去细胞壁，分离出具有活力的原生质体，获得原生质体后就可以进行植物体细胞杂交了。植物体细胞杂交的过程实质是不同植物体细胞的原生质体融合的过程。将不同植物体细胞放在一起培养，必须通过一定的技术手段进行人工诱导。诱导方法有物理法和化学法两大类。物理法就是利用离心、振动、电刺激等促使原生质体融合；化学法是用聚乙二醇等试剂作为导细胞的原生质体融合，聚乙二醇简称为PEG。重压不能促使原生质体的融合。

考点：细胞融合的概念及方法

【名师点睛】诱导细胞融合的方法：

（1）电融合．此方法是先将两种原生质体以适当的比例制成细胞悬液，将其滴入电融合小室中，给小室两极以交变电流，使原生质体沿电场方向聚集成串珠状，接着给以瞬间高强度的电脉冲，使原生质体膜产生局部破损而融合。

（2）化学融合：现通常使用聚乙二醇（PEG）作为融合剂．PEG可以破环细胞间相互排斥的表面作用力，从而使相邻细胞聚集而促进融合．另外，化学融合方法还有高pH-高Ca2+法，其基本原理是中和原生质体表面所带电荷，使原生质体的质膜紧密接触，从而有利于质膜的接触融合。

（3）灭活病毒诱导的细胞融合的机制：此方法适用于动物细胞的融合．通常使用灭活的仙台病毒．利用灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合．在诱导细胞发生融合前，必须先用紫外线将病毒灭活，再稀释到一定浓度后加入到细胞悬液中诱导细胞融合．但由于病毒难以保存，所以诱导动物细胞融合时通常使用PEG。