Question

人血清白蛋白(HSA) 具有重要的医用价值，只能从人血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径。

（1）为获取HSA基因，首先需采集人的血液，提取_____________合成总cDNA，然后以cDNA为模板，采用PCR技术扩增HSA基因。下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向，请用箭头在方框内标出另一条引物的位置及扩增方向。

（2）启动子通常具有物种及组织特异性，构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体，需要选择的启动子是_____________（填写字母，单选）。

A.人血细胞启动子   B.水稻胚乳细胞启动子  C.大肠杆菌启动子 D.农杆菌启动子

（3）利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，需添加酚类物质，其目的是____________。

（4）人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才有活性。与途径Ⅱ相比，选择途径Ⅰ获取rHSA的优势是____________________________________。

（5）为证明rHSA具有医用价值，须确认rHSA与_________________的生物学功能一致。

Answer

（1）总RNA （或mRNA）

（2）B

（3）吸引农杆菌移向水稻受体细胞，有利于目的基因成功转化（2分）

（4）水稻是真核生物，具有膜系统，能对初始rHSA多肽进行高效加工（2分）

（5）HSA

【解析】（1）合成总cDNA需提取细胞中所有的mRNA，然后通过逆转录过程获得。采用PCR技术扩增HSA时，母链的方向是3＇到5＇，子链的延伸方向是5＇到3＇，两条引物分别与模板链的5＇端互补配对结合，引导子链延伸，故两条引物延伸方向是相反的。

（2）根据启动子通常具有物种及组织特异性，在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA，需选择水稻胚乳细胞的启动子。

（3）农杆菌具有趋化性，即植物的受伤组织会产生一些糖类和酚类物质吸引农杆菌向受伤组织集中转化。研究证明，主要酚类诱导物为乙酰丁香酮和羧基乙酰丁香酮，这些物质主要在双子叶植物细胞壁中合成，通常不存在于单子叶植物中。水稻是单子叶植物，不能产生上述的酚类化合物，故在农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，需要添加酚类化合物，吸引农杆菌移向水稻受体细胞，有利于目的基因的转移。

（4）水稻是真核生物，具有生物膜系统，能对初始rHSA多肽进行加工才能形成正确的空间结构，获得的HAS才有活性，而大肠杆菌是原核生物，细胞中不具有膜结构的细胞器，无法对初始rHSA多肽进行加工。

（5）为证明rHSA具有医用价值，需确认rHSA与天然的HSA的生物学功能是否一致。

【考点定位】基因工程的原理及技术；基因工程的操作程序；基因工程的应用

【名师点睛】本题结合生成rHSA的实例考查目的基因的获取、基因表达载体的构建、农杆菌转化法、受体细胞的选择、目的基因的检测与鉴定。解题关键是明确基因工程原理和操作程序等相关知识。