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尿素是一种重要的农业肥料,但若不经细菌的分解,就不能很好地被植物利用。同学们设计...

尿素是一种重要的农业肥料,但若不经细菌的分解,就不能很好地被植物利用。同学们设计了以下实验来探究土壤中微生物对尿素的分解作用,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分及操作过程如下所示。(10分)

回答问题:

(1)制备培养基的一般步骤:计算→称量→溶化→定容→调整PH→          →倒平板

(2)培养基的类型很多,但培养基中一般都含有             、氮源、水和无机盐,上述培养基中“目的菌”生长所需的碳源和氮源分别是                        ,从用途划分这种培养基属于        

培养基,而从物理性质的角度划分属于           培养基。

(3)分离纯化微生物最常使用的接种方法是__          __和___           ___两种。

(4)为充分说明上表所示培养基具有选择作用,应配制牛肉膏蛋白胨培养基作为实验对照,如果该培养基上的菌落数明显            (选填“多于”或“少于” )表中培养基中的菌落数目,说明表中培养基已筛选出一些目的菌。

(5)对分离的菌种进行鉴定时,需要在上述培养基中加入酚红指示剂,细菌合成的脲酶 将尿素分解为氨,pH增高,使指示剂变             

 

(1)灭菌 (2)碳源 葡萄糖 尿素 选择 固体 (3)平板划线法 稀释涂布平板法 (4)多于 (5)红色 【解析】(1)制备培养基的一般步骤:计算→称量→溶化→定容→调整PH→灭菌→倒平板。(2)培养基的类型很多,但培养基中一般都含有碳源、氮源、水和无机盐。“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别有含氮元素的尿素和含碳元素的葡萄糖提供。按功能不同,培养基可分成两类,鉴别培养基和选择培养基,培养基中不加其它氮素,只把尿素作为唯一氮源,其目的是想从众多微生物中选出能分解尿素的目的菌,所以属于选择培养基。按物理性质分,上述培养基添加了较多的琼脂,所以属于固体培养基。(3)分离纯化微生物最常使用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法两种。(4)为充分说明上表所示培养基具有选择作用,应配制牛肉膏蛋白胨培养基作为实验对照,如果该培养基上的菌落数明显多于表中培养基中的菌落数目,说明表中培养基已筛选出一些目的菌。(5)目的菌之所以能利用尿素,是因为体内的脲酶能将尿素分解成氨,氨可以作为细菌的氮源,同时会使培养基的pH升高,升高的PH会使酚红指示剂变为红色,因此可以通过检测培养基pH的变化来判断尿素是否被分解。 【考点定位】微生物的培养和应用 【名师点睛】本题借“探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用”的实验考查微生物的培养和应用,涉及了微生物培养的培养基的配方及营养成分、选择培养基的选择作用、常用的接种方法、无菌操作技术、对分解尿素的菌的鉴定等相关知识的综合性考查,回忆微生物培养的培养基的配方和营养成分、选择培养基的选择作、常用的接种方法的具体操作和目的,无菌操作技术、对分解尿素的菌的鉴然后结合问题进行解答。  
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考点分析:
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利用微生物分解淀粉生产糖浆具广阔的应用前景。某同学为了从长期种植马铃薯的土壤中分离出能够高效分解淀粉的细菌,进行了如下实验。

(1)实验步骤:

①配制以            为碳源的固体培养基,为了使培养基凝固成固体,应该向培养基中加入的物质是               

②将土壤样品接种到已灭菌的培养基上,在恒温培养箱中培养一段时间后,培养基上出现   

将接种针用                    法灭菌后,从②中的培养基上挑取一定量细菌,接种入             (固体、半固体、液体)培养基,在恒温摇床上培养24h,使细菌大量繁殖。

④配制与①相同的培养基,并加入少量碘液,使培养基呈蓝紫色。用                  法将上一步大量繁殖后的细菌接种到灭菌的培养基上。

⑤培养一段时间后,观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小。周围出现较大的           现象的菌落即为初选菌落,经进一步分离纯化后即可达到实验目的。

(2)上述所有倒平板和接种操作,都应在超净台上酒精灯           附近进行。

(3)上述实验步骤中,从用途看,①所用培养基属于             培养基,⑤所培养基属于              培养基

 

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下面是果酒和果醋作的实验流程和某同学设计的果酒和果醋的发酵装置。根据图示回答下列问题:

(1)图1方框中的实验流程该为                 

(2)果酒的制作离不开酵母菌。酵母菌是一类                 (呼吸类型)微生物。在无氧条件下,酵母菌进行               ,其反应式为                               。在酵母菌只进行有氧呼吸时,其吸氧量和二氧化碳的释放量              

(3)与酵母菌相比,酸菌细胞结构的主要差别是                                  

(4)果汁发酵后是否有酒精产生,可以用化学试剂            来检验。在           条件下该试剂与酒精反应呈现灰绿色。

(5)图2装置中的充气口在果酒发酵时         ,在醋酸发酵时连接充气泵,并不断向内泵入           

 

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下列有关生物技术的说法,正确的是  

A. 制作果醋时应避免通入空气以保证有关菌种正常代谢

B. 制作果酒时应反复冲洗葡萄以避免杂菌的影响

C. 测定土壤中能分解尿素的细菌数目,应采用平板划线法

D. DNA粗提取时,用体积分数为95%的冷却酒精进一步纯化DNA

 

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去除DNA杂质时,可直接在滤液中加入(  ),反应10-15min。

A.嫩肉粉    B.蒸馏水    C.2mol/lNaCl    D.酒精

 

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在提取DNA的实验中,破碎血细胞时,要先加入20 mL的蒸馏水,其作用是( 

A.使DNA溶解水中         B.使血细胞破裂,DNA释放

C.稀释血液,防止凝固     D.有利于搅拌

 

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