下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。
(1) 技术和 技术是获得单克隆抗体的基础。
(2)图中A过程是从小鼠的脾脏中取得 细胞,该细胞能够产生 。从小鼠体内提取分离该细胞之前,应给小鼠注射 类物质。
(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比。最大的优越性是 。
(4)制备过程中,第二次筛选的目的是 。
(5)杂交瘤细胞体外培养过程中,为避免毒害,常采取的措施是 。
(6)如果破坏杂交瘤细胞中的核仁,抗体合成将不能进行,因该结构与 的形成有关。
在20世纪初,科学家用植物细胞杂交方法,将白菜的原生质体和甘蓝的原生质体融合,成功地培育出了“白菜﹣甘蓝”杂种植株,据图回答下列问题:
(1)过程b完成的标志是__________。要促进杂种细胞的分裂生长,培养基中应有营养物质和激素,其中激素包括_____和_____两类植物激素。
(2)在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中,依据的原理是_________,c涉及的分裂方式为___________________。
(3)若白菜细胞内有m条染色体,甘蓝细胞含n条染色体,则“白菜﹣甘蓝”细胞内含____条染色体;若杂种细胞培育成为“白菜﹣甘蓝”植株为四倍体,则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于几倍体植株?__________。
(4)要制备“白菜﹣甘蓝”人工种子,要选取具有生根发芽能力的__________(结构),包裹上人工种皮制得。
下图是植物细胞杂交过程示意图,请据图回答:
(1)植物体细胞杂交的第①步是去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体。目前此步骤最常用的方法是 法,也就是在温和的条件下用 等分解植物的细胞壁。
(2)②过程的发生必须进行人工诱导。人工诱导原生质体融合的原理是 ,常用的化学方法是用 试剂作为诱导剂诱导融合。动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同,诱导融合的方法类似,动物细胞的融合还常用到 作为诱导剂。
(3)与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞器为 。
(4)④过程称为 ,⑤过程称为 。若利用此技术生产治疗癌症的抗癌药物——紫杉醇,培养将进行到 (填字母编号)即可。
(5)植物体细胞杂交在育种工作中具有广泛的应用价值,其突出的优点是可以 。
下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:
(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后,分别含有_ __、 ____个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越__________。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用Sma Ⅰ切割的原因_______ _____。
(4)与只使用EcoRⅠ相比较,使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止___________________________________________________
(5)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在_________________的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。
(6)基因工程中利用乳腺生物反应器生产-抗胰蛋白酶,应选用__________切割含有目的基因的DNA片段和载体,并用__________方法导入__________中,再利用SRY探针 (Y染色体上的性别决定基因)进行检测,将检测反应呈________(选填“阳”、“阴”)性的胚胎进行移植培养。
为增加油菜种子的含油量,研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连,导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。
(1)研究人员依据基因的已知序列设计引物,采用 技术从陆地棉基因文库中获取酶
D基因,从拟南芥基因文库中获取转运肽基因,所含三种限制酶(ClaI、SacI、XbaI)的切
点如下图所示。则用 和 酶处理两个基因后,可得到 端与
端(填图中字母)相连的融合基因。
(2)将上述融合基因插入右上图所示Ti质粒的T-DNA中,构建 并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含 的固体培养基上培养得到含融合基因的单菌落,再利用液体培养基震荡培养,可以得到用于转化的侵染液。
(3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间,此过程的目的是 。
(4)进一步筛选后获得转基因油菜细胞,该细胞通过 技术,可培育成转基因油菜植株。用 法在分子水平上可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达。
现在可用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素,请回答相关问题
(1)此基因工程中的目的基因是 ,要想在体外获得大量该目的基因的片段,可以采用______ 技术。在培育转基因番茄的过程中所用基因的“剪刀”是 ,基因的“运载工具”是 。将人工合成的DNA片段拼接在一起,所需要的酶有 。
(2)将重组质粒放入番茄植株的受体细胞中常用的方法是 。
(3)为从根本上解决水稻中的高植酸问题,可将植酸酶基因导入水稻,培育低植酸转基因水稻品种。下图是获取植酸酶基因的流程。
据图回答:
①图中基因组文库 (小于/等于/大于)cDNA文库。
②B过程需要的酶是 ;A、C过程中 (可以/不可以)使用同一种探针筛选含目的基因的菌株。