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图1表示含有目的基因D的DNA片段和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱...

图1表示含有目的基因D的DNA片段和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有MspⅠ、

BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点,分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG.请回答下列问题:

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(1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个脱氧核苷酸之间由      (填化学键名称)连接.

(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,产生的末端是      末端,其产物长度为     

(3)若图1中虚线方框内的碱基对被T﹣A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d.从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有      种不同的DNA片段.

(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是      .在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加了      的培养基进行培养.经检测,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达,其最可能的原因是     

 

(1)磷酸二酯键 (2)平 537bp、790bp、661bp (3)4 (4)BamH I 抗生素B 同种限制酶切割形成的末端相同,部分目的基因D与质粒反向连接 【解析】 试题分析:(1)一条脱氧核苷酸链中相邻两个脱氧核苷酸之间由磷酸二酯键连接. (2)SmaⅠ识别的序列为GGGCCC,切割会产生平末端;图1中DNA片段含有两个SmaⅠ识别位点,第一个识别位点在左端534 bp序列向右三个碱基对的位置;第二个识别位点在右端658bp序列向左三个碱基的位置,从而两个位点切割后产生的DNA片段的长度分布为534+3,796﹣3﹣3,658+3,即得到的DNA片段长度为537、790、661. (3)在杂合子体内含有基因D和基因d,基因D的序列中含有两个识别位点,经过SmaI完全切割会产生537bp、790bp和661bp三种不同长度的片段,基因d的序列中含有一个识别位点,经过切割后会产生1327bp和661bp两种长度的片段,综上,杂合子中分离到该基因的DNA片段经过切割后会产生4种不同长度的片段. (4)能够获取目的基因并切开质粒的限制酶有识别序列为GGATCC的BamH I和识别序列为GATC的MboI,若使用Mbo I会同时破坏质粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因,所以要用BamH I来切割目的基因和质粒,切割后保留了完整的抗生素B抗性基因,便于筛选出含有重组质粒的大肠杆菌.因为目的基因和运载体是用同种限制酶切割的,目的基因两端的末端和质粒切割后的两个末端都能进行互补,可能出现目的基因反向连接在运载体上的情况,导致基因D不能正确表达. 故答案为:(1)磷酸二酯键 (2)平 537bp、790bp、661bp (3)4 (4)BamH I 抗生素B 同种限制酶切割形成的末端相同,部分目的基因D与质粒反向连接  
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2n/4n 嵌合体胚胎是指用四倍体 (4n )胚胎与二倍体胚胎(2n )或胚胎干细胞 (ES 细胞)进行聚合,形成由二倍体和四倍体细胞组成的嵌合体.2n/4n 嵌合体胚胎的构建常用方法如图,请据图分析回答:

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(1)受精卵是胚胎发育的开端,图中的卵细胞达到      时期,才具备受精的能力,而精子需经过      过程才能和卵细胞结合.

(2)2N的ES细胞来自胚胎发育过程的      期,本实验中从功能上说明了该细胞     

(3)2n/4n 嵌合体胚胎的构建用到的现代生物工程技术主要有:     

(4)ES细胞经嵌合体方法培育的动物与核移植方法培育的动物相比,遗传物质来源的区别主要是什么?     

 

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回答下列关于细胞工程的两个问题

I.甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物,甲含有效成分A,乙含有效成分B.某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物.回答下列问题:

(1)为了培育该新型药用植物,可取甲和乙的叶片,先用      酶去除细胞壁,获得具有活力的      ,再用化学诱导剂诱导二者融合.形成的融合细胞进一步培养形成      组织,然后经过      形成完整的杂种植株.这种培育技术称为     

(2)上述杂种植株属于多倍体,多倍体是指      .假设甲与乙有性杂交的后代是不育的,而上述杂种植株是可育的,造成这种差异的原因是     

Ⅱ.某课外小组同学用愈伤组织同时进行了两组实验:甲组培养基中含3%的蔗糖,乙组培养基中不含蔗糖,经灭菌后接种,每组实验再分为两个小组,分别在光下和暗处培养.1个月后,观察植物体生长、分化情况,结果如表:

培养条件

甲组

乙组

光下

正常生长,分化

不生长,死亡

暗处

正常生长,不分化

不生长,死亡

由此得出的结论是:①      ;②     

 

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植物甲具有极强的耐旱性,其耐旱性与某个基因有关.若从该植物中获得该耐旱基因,并将其转移到耐旱性低的植物乙中,有可能提高后者的耐旱性.

回答下列问题:

(1)理论上,基因组文库含有生物的      基因;而cDNA文库中含有生物的      基因.

(2)若要从植物甲中获得耐旱基因,可首先建立该植物的基因组文库,再从中      出所需的耐旱基因.

(3)将耐旱基因导入农杆菌,并通过      法将其导入植物      的体细胞中,经过一系列的过程得到再生植株.要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达,应检测此再生植株中该基因的      ,如果检测结果呈阳性,再在田间试验中检测植株的      是否得到提高.

(4)假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交,子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为3:1时,则可推测该耐旱基因整合到了      (填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”).

 

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胚胎干细胞是哺乳动物或人早期胚胎中的细胞,可以进一步分裂、分化成各种组织干细胞,再进一步分化成各种不同组织.下列叙述不正确的是(  )

A.各种组织干细胞分化形成不同组织细胞是基因选择性表达的结果

B.胚胎干细胞有细胞周期,神经干细胞分化形成的神经细胞没有细胞周期

C.造血干细胞分化形成红细胞、白细胞的过程是不可逆的

D.肝脏干细胞分化成肝细胞的过程体现了细胞的全能性

 

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胚胎移植主要包括以下步骤,排出正确顺序(  )

①配种或进行人工授精     ②检查      ③对胚胎进行移植      ④移植后的检查    ⑤对供、受体的选择和处理      ⑥对胚胎的收集     ⑦培养或保存.

A.①⑤⑥②⑦③④    B.⑤①⑥②⑦③④

C.⑤①⑥⑦②③④    D.①⑤⑥⑦②③④

 

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