Question

下表是某同学列出的分离并计数土壤中微生物培养基的配方，据此回答下列问题：

KH2PO4	1．4g
Na2HPO4	2．1g
MgSO4·7H2O	0．2g
葡萄糖	10．0g
尿素	1．0g
琼脂	15．0g

（1）制备培养基时，将上述物质溶解并用蒸馏水定容至1000mL后，还要进行         和           。

（2）从功能上看，该培养基属于         培养基，细菌能利用培养基中的氮源是由于能合成         。

（3）用稀释涂布平板法统计样本菌落数时，         （需要/不需要）设置对照组（即不接种进行培养），原因是                                                                             。

（4）某同学在3个培养基上分别涂布稀释倍数为10⁶的土壤样液0．1mL，培养一段时间后，其菌落数分别为180、220、320个，则每毫升原土壤样液中上述微生物的数量为          ，此方法测定的活菌数比实际活菌数少的原因为                                                                     。

Answer

（1）灭菌 倒平板

（2）选择 脲酶（催化尿素分解的酶）

（3）需要（1分） 判断培养基是否被杂菌污染

（4）2．4×109 当两个或多个细菌连在一起时，平板上只能观察到一个菌落

【解析】

（1）用稀释涂布平板法统计的菌落数，制备培养基时，将上述物质溶解并用蒸馏水定容至1000mL后，还要进行灭菌和倒平板。

（2）该培养基中含有尿素为唯一氮源，是选择培养基，提供氮源的是尿素，细菌体内有脲酶，能利用尿素。（3）用稀释涂布平板法统计样本菌落数时需要设置对照组，主要用于判断培养基是否被杂菌污染。（4）1毫升原土壤样液中上述微生物数量=（180+220+320）÷3×106×10=2．4×109个，用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低的原因是培养基上的菌落可能是由两个或多个细菌形成的。

【考点定位】微生物的分离和培养、培养基对微生物的选择利用

【名师点睛】解答本题需掌握：

1、培养微生物时，培养基中需要加入碳源、氮源、无机盐、水，还需要满足微生物生长对PH，特殊营养物质以及氧气的要求．如培养乳酸菌需要加入维生素，培养霉菌需要把PH值调到酸性等；

2、能够分解利用尿素的细菌，其细胞内含有脲酶，可以把尿素分解成氨，提供N源，进一步利用，只含有尿素作为N源的培养基对微生物具有选择作用。