花椰菜易受黑腐病菌的危害而害黑腐病,野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化,并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合,以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。
据图回答下列问题:
(1)过程①所需的酶是 。过程②中PEG还可以用 等物理方法替代,全部过程用到的生物技术的原理是 。
(2)过程②后,在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的 存在,这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。原生质体经过 再生,进而分裂和脱分化形成愈伤组织。
(3)若分析再生植株的染色体变异类型,应剪取再生植株和 植株的根尖,通过 、 、染色和制片等过程制成装片,然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。
(4)采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增,得到两亲本的差异性条带,可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1—4进行PCR扩增的结果。据图判断,再生植株1—4中一定是杂种植株的有 。
GDNF是一种神经营养因子,对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图1所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究。请回答:
(1)在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中,使用胰蛋白酶的目的是 。
(2)基因工程中最常用的载体是 。构建含GDNF基因的表达载体时,需选择图1中的 限制酶进行酶切。基因表达载体中必须有启动子、 、 等三部分。
(3)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接,连接产物经筛选得到的载体主要有三种:单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示)。为鉴定这3种连接方式,选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切,并对酶切后的DNA片段进行电泳分析,结果如图2所示。图中第 泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。
(4)将正向连接的表达载体导入神经干细胞的方法是 。当培养的神经干细胞达到一定的密度时,需进行 培养以得到更多数量的细胞。
(5)科学家使用转基因动物生产药物时通常将药用蛋白基因与 等调控组件重组在一起导入哺乳动物的受精卵中,使转基因动物通过分泌的乳汁来生产药物,此转基因动物被称作 。
植物甲具有极强的耐旱性,其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因,并将其转移到耐旱性低的植物乙中,有可能提高后者的耐旱性。
回答下列问题:
(1)理论上,基因组文库含有生物的 基因;而cDNA文库中含有生物的 基因。
(2)将耐旱基因导入农杆菌,并通过 方法将其导入植物 (甲或乙)的体细胞中,此方法中Ti质粒上T-DNA的作用是 。
(3)要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达,可以在分子水平上检测此再生植株中 。
(4)假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交,子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为3∶1时,则可推测该耐旱基因整合到了 (填“同源染色体的两条上”或“同源染色体的一条上”或“两条非同源染色体上”)。
有关原生质体的下列叙述中,正确的是( )
①组成原生质体的主要生命物质是蛋白质和核酸 ②原生质体包括细胞膜、液泡膜及两者之间的原生质 ③被脱掉细胞壁的植物裸露细胞是原生质体 ④原生质体只能用于植物细胞工程
A.①③ B.①② C.③④ D.①
下列现代生物科技的应用中,不需要进行检测和筛选的是( )
A.制备单克隆抗体过程
B.对植物的茎尖进行组织培养获得脱毒苗
C.利用植物体细胞杂交技术培育“萝卜一甘蓝”
D.将抗虫基因导入植物细胞,培育具有抗虫性状的新植株
下列过程中,没有发生膜融合的是( )
A.植物体细胞杂交 B.受精过程
C.氧进入细胞中的线粒体 D.效应B细胞产生抗体