| 1. 难度：简单 | |
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下列属于获取目的基因的方法的是 ①利用mRNA反转录形成 ②从基因组文库中提取 ③从受体细胞中获取 ④利用PCR技术合成 ⑤利用DNA转录合成 ⑥人工合成 A. ①②③⑤ B. ①②⑤⑥ C. ①②③④ D. ①②④⑥
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| 2. 难度：中等 | |
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限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHI，EcoRI，HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合？其正确的末端互补序列为（ ）
A．BamHI和EcoRI；末端互补序列—AATT— B．BamHI和HindⅢ；末端互补序列—GATC— C．EcoRI和HindⅢ；末端互补序列—AATT— D．BamHI和BglII；末端互补序列—GATC—
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| 3. 难度：中等 | |
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在基因工程的操作过程中，获得重组质粒不需要 ①DNA连接酶 ②同一种限制酶 ③RNA聚合酶 ④具有标记基因的质粒 ⑤目的基因 ⑥4种脱氧核苷酸 A. ③⑥ B. ②④ C. ①⑤ D. ①②④
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| 4. 难度：中等 | |
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下列属于PCR技术的条件的是 ①引物 ②目的基因所在的DNA片段 ③脱氧核苷酸 ④核糖核苷酸 ⑤DNA连接酶 ⑥DNA聚合酶 ⑦限制酶 A. ①②③⑤ B. ①②③⑥ C. ①②③⑤⑦ D. ①②④⑤⑦
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| 5. 难度：简单 | |
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下列叙述不正确的是 A. 质粒在宿主细胞内可整合到染色体DNA上 B. 质粒是独立于细菌拟核DNA之外的小型细胞器 C. 基因工程操作中的质粒一般都是经过人工改造的 D. 烟草花叶病毒可作为基因工程中的载体
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| 6. 难度：中等 | |
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人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体加工合成。通过转基因技术，可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是 A．大肠杆菌 B．酵母菌 C．T4噬菌体 D．质粒DNA
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| 7. 难度：简单 | |
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有关基因工程的成果及应用的说法正确的是( ) A．用基因工程方法培育的抗虫植物也能抗病毒 B．基因工程在畜牧业上应用的主要目的是培养体型巨大、品质优良的动物 C．基因工程在农业上的应用主要是培育高产、稳产、品质优良和具有抗逆性的农作物 D．目前，在发达国家，基因治疗已用于临床实践
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| 8. 难度：中等 | |
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下列叙述错误的是 A. 从基因组文库中获取的某种生物的部分基因，可以实现物种间的基因交流 B. 基因探针是指用放射性同位素或荧光分子等标记的含目的基因DNA分子 C. 基因治疗主要是对有基因缺陷的细胞进行替换 D. 用人胰高血糖素基因制成的DNA探针，检测人胰岛B细胞中的mRNA，可形成杂交分子
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| 9. 难度：中等 | |
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将耐高温淀粉酶(Amy)基因a与载体结合后导入马铃薯植株中，经检测发现Amy在成熟块茎细胞中存在。下列叙述不正确的是
A. 获取基因a的限制酶的作用部位是图中的① B. 连接基因a与载体的DNA连接酶的作用部位是图中的② C. 基因a进入马铃薯细胞后，经复制可传给子代细胞 D. 通过该技术人类实现了定向改造马铃薯的遗传性状
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| 10. 难度：中等 | |
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水母发光蛋白由236个氨基酸构成,其中Asp、Gly和Ser构成发光环,现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。在转基因技术中,这种蛋白质的作用是 A. 促使目的基因导入受体细胞中 B. 促使目的基因在受体细胞中复制 C. 筛选出获得目的基因的受体细胞 D. 使目的基因容易成功表达
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| 11. 难度：中等 | |
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据下图分析，下列有关基因工程的说法不正确的是
A. 为防止目的基因与质粒任意结合而影响基因的表达，应用限制酶Ⅰ、Ⅱ同时切割二者 B. 限制酶、DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键 C. 与启动子结合的是RNA聚合酶 D. 能够检测到标记基因表达产物的受体细胞中，也一定会有目的基因的表达产物
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| 12. 难度：中等 | |
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农杆菌转化法转移目的基因进入受体细胞，目的基因的最终插入位置是 A. Ti质粒上 B. 受体细胞染色体上 C. T-DNA上 D. 细胞质中
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| 13. 难度：中等 | |
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为达到相应目的，必须通过分子检测的是 A．携带链霉素抗性基因受体菌的筛选 B．产生抗人白细胞介素8抗体的杂交瘤细胞的筛选 C．转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定 D．21三体综合征的诊断
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| 14. 难度：简单 | |
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用人的胰岛素基因制成的DNA探针检测下列物质，不能形成杂交分子的是( ) A.该人胰岛A细胞中的DNA B.该人胰岛B细胞中的mRNA C.该人胰岛A细胞中的mRNA D.该人肝细胞中的DNA
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| 15. 难度：中等 | |
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现有一长度为1000碱基对（by）的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000 by，用KpnI单独酶切得到400 by和600 by两种长度的DNA分子，用EcoRI,KpnI同时酶切后得到200by和600by两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是 A. C.
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| 16. 难度：中等 | |
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要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株，不需要（ ） A．具有完整细胞核的细胞 B．离体细胞 C．导入外源基因 D．一定的营养物质和激素
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| 17. 难度：中等 | |
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下列技术或方法与原理相符的是（ ） A．人参细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞全能性 B．植物组织培养和制备单克隆抗体——细胞增殖 C．原生质体融合和动物细胞融合——细胞膜的流动性 D．纤维素酶、果胶酶处理植物细胞壁——酶的高效性
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| 18. 难度：中等 | |
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通过植物组织培养技术繁育农作物，其优点不包括（ ） A．加快繁育速度 B．保持亲本优良性状 C．培育出无病毒植株 D．改变植物的基因型
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| 19. 难度：中等 | |
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下列有关植物组织培养技术的叙述，正确的是（ ） A．经脱分化和再分化过程形成的幼芽细胞不具有细胞全能性 B．在愈伤组织培养中加入聚乙二醇，可获得染色体加倍的细胞 C．利用纤维素酶和果胶酶去除外植体的细胞壁有利于脱分化的发生 D．培养基中生长素和细胞分裂素的比例将影响愈伤组织分化的方向
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| 20. 难度：中等 | |
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下列有关细胞工程的叙述错误的是 A．选择高度分化的动物体细胞进行培养不利于获得大量细胞 B．选择胚胎细胞作为核供体进行核移植可提高克隆动物的成功率 C．植物愈伤组织经液体悬浮培养可以得到具有胚性细胞特征的单细胞 D．用纤维素酶和果胶酶水解法获得的植物细胞原生质体失去了全能性
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| 21. 难度：中等 | |
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下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是 A.培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞 B. 克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变 C. 二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的 D. 恶性细胞系的细胞可进行传代培养
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| 22. 难度：中等 | |
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根据单克隆抗体制备流程示意图判断以下选项中正确的是 A. 单克隆抗体技术的原理包括细胞增殖、细胞膜的流动性、细胞的全能性等 B. 根据培养基的物理性质分类,图中HAT培养基属于选择培养基 C. 在制备单克隆抗体的过程中有两次筛选,第一次是筛选杂交瘤细胞,第二次是筛选能够产生高特异性抗体的杂交瘤细胞 D. 小鼠骨髓瘤细胞染色体数是40,B淋巴细胞的染色体数为46,融合后形成的杂交瘤细胞DNA分子数为86
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| 23. 难度：中等 | |
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用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是 A．纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B．体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体 C．等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 D．用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者
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| 24. 难度：中等 | |
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下列对动物核移植技术的描述不正确的是（ ） A．哺乳动物核移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植，动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎核移植 B．体细胞核移植的过程中可通过显微操作去核法去除卵母细胞中的核 C．体细胞核移植过程中通常采用MⅡ期卵母细胞作为受体细胞 D．通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对供体细胞动物进行了100%的复制
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| 25. 难度：简单 | |
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生物工程的兴起标志着人们从认识生命活动的奥秘，到按照人们的愿望改造生物的巨大飞跃。下列选项中能正确说明生物工程技术应用的是 A.植物组织培养是指离体的植物器官或细胞进行脱分化形成新个体 B.基因治疗目前正处在初期的临床试验阶段 C.人工诱变、细胞工程、基因工程等都能对微生物进行定向改造 D.动物细胞融合技术的最重要用途是培养具有双亲优良性状的经济动物
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| 26. 难度：中等 | |
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关于“克隆羊”、“试管羊”、“转基因羊”的说法合理的是 A. 在培育过程中，都用到了动物细胞培养技术、核移植技术、胚胎移植技术 B. 它们的遗传物质都只来自一个亲本 C. 它们是通过相同的生殖方式获得的 D. 它们在形成过程中，一般都有卵细胞参与
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| 27. 难度：简单 | |
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下列细胞，哪一个代表已经完成受精的卵子 A.
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| 28. 难度：中等 | |
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蛙的受精卵发育成原肠胚的过程中，下列行为在细胞内不能发生的是 A．基因的选择性表达 B．DNA的半保留复制 C．同源染色体的分离 D．姐妹染色单体的分开
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| 29. 难度：中等 | |
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通过胚胎移植技术，可以实现良种牛的快速繁殖。下列相关叙述正确的是 A. 对供体和受体母牛都要进行相同激素处理 B. 受精和胚胎的早期培养都需要在体外进行 C. 对冲卵获得的原肠胚检查合格后方可移植 D. 胚胎分割移植实现同卵多胎的成功率较低
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| 30. 难度：中等 | |
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体外受精常用的采卵方法有 ①从输卵管冲取卵子 ②假阴道法 ③电刺激法 ④从动物卵巢吸取卵母细胞 A. ①② B. ②③ C. ③④ D. ①④
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| 31. 难度：简单 | |
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以下关于桑椹胚的说法不正确的是 A．胚胎细胞达到32个左右，形似桑椹 B．每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，即每个细胞都具有全能性 C．良种母牛体内此时的细胞都有可能克隆出基因型完全相同的小牛，性别一定为雌性 D．是由受精卵经有丝分裂产生的
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| 32. 难度：中等 | |
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受精过程的顺序为 ①第一次卵裂开始 ②释放第二极体 ③顶体反应 ④穿越透明带 ⑤雌、雄原核的形成 ⑥核膜消失，雌、雄原核融合 A. ①②③④⑤⑥ B. ③②④⑤⑥① C. ④⑤②①③⑥ D. ③④②⑤⑥①
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| 33. 难度：中等 | |
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供、受体母牛选择好后，要用激素进行同期发情处理的原因是 A．防止受体牛不愿意接受胚胎 B．只有受体与供体的生理状态相同，被移植的胚胎才能继续正常发育 C．只要发情排卵后，各阶段时间内的变化，供、受体生理状态完全相同 D．同期发情处理后，卵细胞和精子受精结合能力强
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| 34. 难度：中等 | |
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分析下面图解判断以下哪一项不是精子、卵细胞发生的区别
A. 初级精母细胞、初级卵母细胞的形成时间 B. MⅠ和MⅡ的时间连续性 C. 成熟生殖细胞是否经过变形 D. 成熟生殖细胞中染色体的数量
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| 35. 难度：中等 | |
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我国引进良种肉牛后，理论上使其快速繁殖的方法有: ①组织培养 ②克隆 ③体外受精和胚胎移植 ④基因工程 ⑤胚胎分割 ⑥体细胞杂交 A. ①②⑥ B. ②④⑥ C. ①②⑤ D. ②③⑤
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| 36. 难度：中等 | |
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如图为高等哺乳动物胚胎发育过程中的某一时期示意图，下列有关叙述不正确的是
A. 进行胚胎分割时，应选择图示时期之后的胚胎进行 B. 高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于图示时期 C. 胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化 D. 图中①②③依次为透明带、滋养层、内细胞团，③具有发育的全能性
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| 37. 难度：中等 | |
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在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵母细胞中才能发育成新个体，最主要的原因是 A. 卵母细胞大，便于操作 B. 卵母细胞含有的营养物质多 C. 卵母细胞的细胞质可使体细胞细胞核全能性得到表达 D. 卵母细胞才具有全能性
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| 38. 难度：困难 | |
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科研人员利用胚胎干细胞培育转基因羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图，下列说法不正确的是
A. 过程①取供体囊胚的内细胞团培养胚胎干细胞，原理是细胞增殖 B. 过程②利用的人凝血因子K基因可以从人的基因组文库中获取 C. 过程③中通过选择培养基，可筛选出含有目的基因的胚胎干细胞 D. 凝血因子IX只在乳腺细胞中表达，原因是其他细胞不含有该基因
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| 39. 难度：中等 | |
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某致病基因h位于X染色体上，该基因和正常基因H中的某一特定序列经BclI酶切后，可产生大小不同的片段（如图1，bp表示碱基对），据此可进行基因诊断。图2为某家庭患此病的遗传系谱。下列叙述错误的是
A. h基因特定序列中BclI酶切位点的消失是碱基序列改变的结果 B. II-1的基因诊断中只出现142bp片段，其致病基因来自母亲 C. II-2的基因诊断中出现142bp，99bp和43bp三种片段，推断其基因型为XHXh D. II-3的丈夫表现型正常，则他们的儿子基因诊断中出现142bp片段的概率为1/2
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| 40. 难度：中等 | |
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某实验室做了下图所示的实验研究。下列相关叙述中正确的是
A. 与纤维母细胞相比，过程①形成的诱导干细胞的全能性较低 B. 单克隆抗体不需细胞膜上载体蛋白的协助就能释放到细胞外 C. 每个Y细胞只产生一种抗体，故过程④不需进行筛选 D. 过程②是诱导干细胞的结构和遗传物质发生稳定性差异的过程
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| 41. 难度：困难 | |
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Ⅰ.在治疗人类某些疾病时，人的体细胞核移植技术得到的胚胎干细胞经诱导分化，形成相应的组织器官后，可用于组织器官的移植，操作流程如图所示。请回答下列问题：
（1）胚胎干细胞是从动物胚胎发育至囊胚期的__________或胎儿的__________中分离得到的一类细胞。 （2）进行图中过程①时，为保持正常的二倍体核型，供体细胞一般都选用______________的细胞。过程②为防止杂菌污染，动物细胞培养液中要加入一定的______。 （3）图中过程③④表示从囊胚中取出细胞．将其培养在_________细胞上能维持不分化的状态，形成大量胚胎干细胞．图中过程⑤在培养液中加入______________，就可以诱导胚胎干细胞向不同类型的组织细胞分化，用于患者的组织器官移植。 Ⅱ. 应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”。请回答： （1）试管牛的培育需经过体外受精、____________、______________等过程。 （2）培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其________。另外，培养的卵母细胞需要发育至减数第二次分裂中期，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和_______________。 （3）通常奶牛每次排出一枚卵母细胞，采用激素处理可使其一次捧出多枚卵母细胞，常使用的激素是_______________ 。
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| 42. 难度：困难 | |
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如图是利用羊来生产人抗凝血酶（AT）的基本流程．图中ampR表示氨苄青霉素抗性基因，如tetR表示四环素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ为三种限制酶及酶切位点．据图回答问题：
（1）通过逆转录人工合成的AT基因____（填“有”或“无”）内含子，可采用______技术来扩增获得的AT基因。 （2）图中将人AT基因插入到质粒前，需要用______________限制酶同时切割载体和含AT基因的片段，筛选含有重组质粒的大肠杆菌首先需要在含____________的培养基上进行。 （3）重组质粒上启动子的功能是____________________。过程①可采用_________法将重组质粒导入羊受精卵中。羊的早期胚胎发育至_______________阶段后通过过程②移植到代孕羊体内。 （4）可采用________________技术从分子水平来检测AT基因是否表达成功。
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| 43. 难度：中等 | |
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白藜芦醇是一种天然的抗氧化剂，可降低血液粘稠度，抑制血小板凝结和血管舒张，保持血液畅通，可预防癌症的发生及发展，具有抗动脉粥样硬化和冠心病，缺血性心脏病，高血脂的防治作用。抑制肿瘤的作用还具有雌激素样作用，可用于治疗乳腺癌等疾病。下图表示利用植物组织培养的方法生产白藜芦醇的过程。请分析作答：
（1）植物组织培养是在无菌和人工控制条件下，将________的植物体器官、组织、细胞，在人工配置的培养基上培养成完整植株，利用的原理是_________________________。 （2）其中①称为____________，①和②过程需要的培养基的激素含量________(填“相同”或“不同”)。 （3）利用细胞产物工厂化生产技术提取白藜芦醇需要将外植体培养至__________，原因是此阶段的细胞分裂能力强。但白藜芦醇的产量一般较低，可以用_______________处理愈伤组织，再筛选产量提高的细胞进一步培养。将产生白藜芦醇相关的________转入水稻、小麦、大豆等重要粮食作物和经济作物中，提高农作物的营养价值和品质。
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| 44. 难度：困难 | |
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人类在预防与诊疗传染病的过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某种传染病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白质为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程如下图所示，请分析回答：
（1）图中所示基因工程的核心步骤是_______________________。过程①要用到____________酶。 （2）若将含有A基因的受体细胞在体外培养，必须满足无菌无毒、营养、____________、气体环境等条件，才能使细胞大量增殖。 （3）过程③采用的实验技术是_______________，该过程常用____________作为诱导剂。 （4）获得的X细胞既能分泌________________，还有____________________的本领。 （5）科学家欲对抗A蛋白的单克隆抗体进行改造，生产出效果更好的嵌合抗体，用于癌症治疗。用蛋白质工程技术对抗A蛋白的单克隆抗体进行改造时，首先必须根据预期_____________，设计_______________，最终通过基因拼接，将抗体基因改造成嵌合抗体基因，然后导入到淋巴细胞中表达。
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