在基因工程的操作过程中，获得重组质粒不需要
①DNA连接酶
②同一种限制酶
③RNA聚合酶
④具有标记基因的质粒
⑤目的基因
⑥4种脱氧核苷酸
A. ③⑥ B. ②④ C. ①⑤ D. ①②④
限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHI，EcoRI，HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合？其正确的末端互补序列为（ ）
A．BamHI和EcoRI；末端互补序列—AATT—
B．BamHI和HindⅢ；末端互补序列—GATC—
C．EcoRI和HindⅢ；末端互补序列—AATT—
D．BamHI和BglII；末端互补序列—GATC—
下列属于获取目的基因的方法的是
①利用mRNA反转录形成
②从基因组文库中提取
③从受体细胞中获取
④利用PCR技术合成
⑤利用DNA转录合成
⑥人工合成
A. ①②③⑤ B. ①②⑤⑥ C. ①②③④ D. ①②④⑥
Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如图（图中数字序号表示的是相关过程）。请回答下列有关问题：
(1)过程①利用的技术是_______________,过程②利用的技术是_______________,过程③中涉及到了基因工程技术，其中作为受体细胞的是_______________。
(2)过程③中获取的目的基因是_______________，可以根据该基因的____________设计引物，利用PCR技术扩增目的基因片段。按此方法和图示技术流程，完成 Rag2基因缺失小鼠的基因治疗涉及的酶有___________________________和耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)等。
(3)图中造血干细胞中的遗传物质至少有 __________个来源。为检测 Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质,用_________________进行杂交实验。
【生物——选修1：生物技术实践】
苹果干腐病是一种名为茶藤子葡萄座腔菌真菌引起的疾病，病菌通常由枝条伤口入浸感染，在伤口处形成溃疡。某中学的科研小组计划分离出该真菌，并进行药物防治实验，为苹果干腐病的防治提供合理的建议。经过查阅资料，确定了分离时所用的PDA培养基配方，如下表所示：
物质 | 马铃薯 | 葡萄糖 | 自来水 | 氯霉素 |
含量 | 200g | 20g | 1000mL | 0.3g |
该真菌在上述PDA培养基上生长时有特定的形态特征：辐射状白色匍匐菌丝，绒毛状。
（1）要获得菌落，则上表中还应添加的成分是___________。氯霉素的作用是_______________。培养基的制备步骤包括计算、称量、溶化、_______、倒平板。等平板冷却凝固后，将平板________，以防止冷凝水污染培养基。
（2）用剪刀从染病枝条溃疡处剪取1×1cm2的患病组织，并用0.1%的升汞进行消毒，置于培养基中心，在合适条件下进行培养，共培养五组。待菌落形态特征稳定后，用___________法将该致病菌分别转移至含有等量0.5%苦水碱剂、40%福美砷、清水的上述PDA培养基中进行抗药性实验,并每隔24h记录一次最后划线区域的菌落数目。
①选取________的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而导致遗漏的菌落数目。
②记录结果如下：
小组 | 0.5% 苦水碱剂 | 40%福美砷 | 清水 |
菌落数目 | 2 | 8 | 17 |
从结果分析可知，__________________能很好的抑制该真菌的生长，适合防治苹果干腐病。
某哺乳动物棒状尾（A）对正常尾（a）为显性；黄色毛（Y）对白色毛（y）为显性，但是雌性个体无论毛色基因型如何，均表现为白色毛。两对基因均位于常染色体上并遵循基因的自由组合定律，请回答：
（1）假设该哺乳动物的一个达到遗传平衡的种群有2000只个体，正常尾个体数量长期维持在4%，若向该种群再引入2000只纯合棒状尾个体，不考虑其他因素的前提下，引入后A的基因频率变为_________。
（2）如果一只黄色个体与一只白色个体交配，生出一只白色雄性个体，则母本的基因型是________________________（只写毛色有关基因）。
（3）现有足够多的棒状尾白色雌雄个体（纯合杂合都有），要选育出纯合棒状尾白色的雌性个体，请简要写出步骤为：
第一步：_____________________________________________________；
第二步：_____________________________________________________，后代（每对双亲产生的后代足够多）只出现一种表现型的亲代雌性个体即为纯合棒状尾白色的雌性个体。
