在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）。

（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理。现有1L土壤浸出液，用无菌吸管吸取1mL样液至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释103稀释度。各取0．1mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原土壤浸出液样中菌体数为________ 。

（2）要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，从用途方面来看，上述培养皿中培养基的成分特点是________________________________________________________________________。

（3）接种技术的核心是__________，是研究和应用微生物的前提。在划线接种时，连续划线的目的是将聚集的菌种逐步_____________,培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是______________________或有氧条件抑制了这些细菌的生长。

（4）在培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是________，有透明带菌落利用的氮源主要是________，据此可筛选出目的菌。实验结果如图显示的A～E五种菌株中，________是最理想菌株。

（5）科研人员用放射线处理该细菌获得两个突变株A和B，然后对突变株A和B进行实验，结果如下表所示：

突变株A不能在一般培养基上生长的原因是________________________。突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中能生长的最可能原因是___________________________________。

现代生物科技在畜牧业生产中有着广泛的应用，以下是科学家采用不同方法培育种牛的过程。请据图答有关问题。

（1）为提高良种奶牛的繁殖能力，在获取卵母细胞之前需用________________对奶牛进行处理，目的是使其________________。

（2）“转基因牛”D培育过程中，常用受精卵作为外源基因的受体细胞，其主要原因是________________。过程h常用的方法是________________。

（3）图中数字标号③代表的结构为________________，c→d过程需对其________________________。A、B牛基因型是否相同？________________________________________。

（4）在培育良种牛的过程中，都运用了动物细胞培养技术．在动物细胞培养过程中，为防止杂菌的污染而要加入一定量的________________________。

科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞（iPS），继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如下：

（1）从黑鼠体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为______________________，培养的细胞在贴壁成长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为______________________。

（2）图中2-细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得，该过程称为___________；也可从灰鼠体内取出卵子，通过___________后进行早期胚胎培养获得。

（3）图中重组囊胚通过______________________技术移入白鼠子宫内继续发育，暂不移入的胚胎可使用______________________方法保存。

（4）小鼠胚胎干细胞（ES）可由囊胚的___________分离培养获得。iPS与ES细胞同样具有发育全能性，有望在对人类iPS细胞进行定向___________后用于疾病的细胞治疗。

（5）哺乳动物胚胎干细胞的特点____________________________________________。

图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp I、BamH I、Mbo I、Sma I4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题

（1）图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由___________连接。

（2）若用限制酶SmaI完全切割图1中DNA片段，其产物长度为______________________。

（3）若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子中分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶Sma I完全切割，产物中共有___________种不同长度的DNA片段。

（4）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是______________________。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加______________________的培养基进行培养。

口蹄疫是由RNA病毒引起的一种偶蹄动物传染病。科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗（主要成分：该病毒的一种结构蛋白VP1），过程如图所示。请据图回答下列问题：

（1）在上述实验过程中所涉及的生物技术工程有_________、_________，如图所示②成功构建重组质粒的过程中，需要用到的工具酶有_________ 和_________。

（2）⑤过程代表的是_________，⑥过程中重要的两种植物激素是_________和_________。

（3）若要检测转化成功的蕃茄植株,除检测标记基因产物外，还可采用_________技术检测目的基因在蕃茄体内是否转录。

（4）该过程运用原理有_________ 、_________ 等。

（5）在该过程中，研究人员首先获取了目的基因，并采用____技术对目的基因进行扩增，该技术的反应体系中应含有_________、酶、原料、模板等；然后构建基因表达载体，基因表达载体中除了具有目的基因、启动子和终止子之外，还需具有____________。

紫草素是紫草细胞的代谢产物，可作为生产治疗烫伤药物的原料．研究人员欲用植物组织培养技术通过培养紫草细胞生产紫草素，下列相关操作不适合的是

A．对作为外植体的紫草叶片进行消毒处理既保证细胞活性也可减轻污染

B．培养基中要加入植物激素保证已分化的植物细胞脱分化形成愈伤组织

C．调节植物激素的种类和比例以保证愈伤组织再分化并得到完整的植株

D．在培养细胞的过程中要不断通入无菌空气以保证氧气的充足供应

下列关于影响植物组织培养的因素的叙述不正确的是

A．幼嫩组织较成熟组织易培养成功

B．给外植体消毒用70%的酒精

C．接种花药后一段时间内不需要光照，但幼小植株形成后需要光照

D．生长素与细胞分裂素含量之比较高时有利于芽的分化

三个培养皿中分别加入10ml不同的培养基，然后接种相同的大肠杆菌样液。培养36小时后，计算菌落数，结果如下表．下列选项正确的是

A．该实验采用的是液体培养基

B．该实验采用平板划线法接种

C．Ⅰ和Ⅲ对照；说明大肠杆菌的生长不需要生长因子

D．Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长需要糖类

分离纤维素分解菌的实验过程中操作错误的是

A．经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上

B．富集培养这一步可省略，但培养的纤维素分解菌少

C．经稀释培养后，用刚果红染色

D．对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上

下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是

A．用蒸馏水配置牛肉膏蛋白胨培养基，经高温，高压灭菌后倒平板

B．取104,105,106倍的土壤稀释液和无菌水各0．1mol分别涂布于各组平板上

C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24—28小时

D．确定对照组无菌后选择菌落数在3以上的实验组平板进行计数