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在基因工程的操作中,为了防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用2种限制酶,选择的...

在基因工程的操作中,为了防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用2种限制酶,选择的原则是  

①质粒内,每种限制酶只有一个切割位点

②目的基因编码蛋白质的序列中,每种限制酶只有一个切割位点

③酶切后,目的基因形成的两个黏性末端序列不相同

④酶切后,质粒形成的两个黏性末端序列相同

A. ①③ B. ①④ C. ②③ D. ②④

 

A 【解析】 基因工程的工具:限制酶、DNA连接酶、运载体。限制酶只能识别特定的脱氧核苷酸序列,并且只能在特定的位点切割。 为了防止自身环化,质粒内只能有每种酶的一个切点,且两种酶切割的黏性末端应该不同,①③正确,④错误;目的基因编码蛋白质的序列中,不能有限制酶的切割位点,②错误。综上所述,BCD不符合题意,A符合题意。故选A。  
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考点分析:
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下列四条DNA分子,彼此间具有粘性末端的一组是(     )

   

A. ①② B. ②③ C. ③④ D. ②④

 

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限制酶BamHⅠ和BglⅡ是两种常见的工具酶,它们的识别序列及切割位点依次为GGATCC和AGATCT。研究中用BamHⅠ切割DNA获得目的基因,用BglⅡ切割质粒,并连接得到重组质粒。相关叙述正确的是

A. 限制酶作用DNA过程中将碱基对之间的氢键切断

B. 目的基因经BamHⅠ切割后形成的黏性末端是—CTAGG

C. 经两种酶处理得到的重组质粒不能再被这两种酶所识别

D. 分别用两种限制酶切割,保证了目的基因定向插入质粒

 

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下列关于基因工程中有关酶的叙述错误的是

A. 限制酶水解相邻核苷酸间的化学键打断DNA

B. DNA连接酶可将末端碱基互补的两个DNA片段连接

C. DNA聚合酶能够从引物末端延伸DMARNA

D. 逆转录酶以一条RNA为模板合成互补的DNA

 

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下列关于基因工程工具的说法不正确的是

A. 构建基因文库和构建基因表达载体都需要限制酶和DNA连接酶

B. DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列有专一性要求

C. 载体能将外源基因导入受体细胞并使其在受体细胞中稳定遗传并表达

D. 在基因工程操作中,被用作载体的质粒,一般都是经过人工改造的

 

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目的基因与运载体结合所需的条件是(    )

①同一种限制酶   

②具有标记基因的质粒   

③RNA聚合酶       

④目的基因

⑤DNA连接酶    

⑥四种脱氧核苷酸       

⑦ATP

A. ①②③④⑤⑥⑦    B. ①②④⑤⑥⑦

C. ①②③④⑤⑦    D. ①②④⑤⑦

 

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