Question

限制酶BamHⅠ和BglⅡ是两种常见的工具酶，它们的识别序列及切割位点依次为G^↓GATCC和A^↓GATCT。研究中用BamHⅠ切割DNA获得目的基因，用BglⅡ切割质粒，并连接得到重组质粒。相关叙述正确的是

A. 限制酶作用DNA过程中将碱基对之间的氢键切断

B. 目的基因经BamHⅠ切割后形成的黏性末端是—CTAGG

C. 经两种酶处理得到的重组质粒不能再被这两种酶所识别

D. 分别用两种限制酶切割，保证了目的基因定向插入质粒

Answer

C

【解析】

限制酶BamHⅠ识别的序列是G↓GATCC，产生的黏性末端序列是GATC-，BglⅡ识别的序列是A↓GATCT，切割产生的黏性末端是GATC-。

限制酶破坏的是磷酸二酯键，A错误；目的基因经BamHⅠ切割后形成的黏性末端是GATC-，B错误；两种限制酶切割产生的黏性末端均为GATC，经过DNA连接酶处理后获得的序列是：-AGATCC-

-TCTAGG-，不能被BamHⅠ和BglⅡ识别，C正确；两种限制酶切割产生的黏性末端相同，仍然会出现自身环化，不能保证目的基因定向插入质粒，D错误。故选C。