Question

生物技术的广泛应用，给社会带来了较大的经济效益，受到社会的广泛关注．请回答下列有关问题：

（1）制作泡菜需要测定亚硝酸盐的含量，方法是________，其原理是：在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与________发生重氮化反应后，与N﹣1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色，将显色反应后的样品与已知浓度的标准液目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。

（2）在香料工业提取的“液体黄金”玫瑰油中，要求不含有任何添加剂或化学原料，其提取方法主要是________；玫瑰精油的提取需要大量原料，通常采用植物组织培养技术来实现玫瑰的快速繁殖。

（3）在制备固定化酵母细胞的过程中，溶化好的海藻酸钠溶液要冷却至室温才能加入已活化的酵母菌，原因是________；如果在CaCl₂溶液中形成的凝胶珠颜色过浅，说明海藻酸钠浓度低，________。

（4）微生物强化采油（MEOR）是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油黏度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用________培养基，实验室紫外线照射前，适量喷洒________或________等消毒液，可以加强效果。

Answer

比色法 对氨基苯磺酸 水蒸气蒸馏法 防止高温杀死酵母菌 固定（包埋）的酵母菌（酵母细胞）数目较少 选择 石炭酸（苯酚） 煤酚皂（甲基苯酚）

【解析】

亚硝酸盐含量测定原理是：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，再与已知浓度的标准显色液目测比较，即酸化→重氮化→显色→比色，估算泡菜中亚硝酸盐含量。植物芳香油的提取方法有蒸馏法、压榨法和萃取等，蒸馏是利用水蒸气将挥发性较强的芳香油携带出来，适用于提取挥发性强的芳香油；压榨法是通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油，适用于易焦糊原料的提取；萃取适用范围广，要求原料的颗粒要尽可能细小，能充分浸泡在有机溶液中；而玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏，故常用蒸馏法。制备固定化酵母细胞的步骤是：酵母细胞的活化→配制CaCl2溶液→海藻酸钠溶化→海藻酸钠与酵母细胞混合→固定化酵母细，注意事项有：①配制海藻酸钠溶液时要小火、间断加热、定容，如果加热太快，海藻酸钠会发生焦糊；②海藻酸钠溶液需冷却后再与酶母细胞混合，注意混合均匀，不要进入气泡；③制备固定化酵母细胞时要高度适宜，并匀速滴入；④刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间，以便Ca2+与Na+充分交换，形成的凝胶珠稳定；⑤如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。在使用超净工作台前，可以用紫外线照射30min，以杀死物体表面或空气中的微生物，在照射前，适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液，可以加强消毒效果。

（1）对亚硝酸盐含量进行测定要用比色法，其原理是在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色的复合物，将显色反应后的样品与已知浓度的标准液目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。

（2）由于玫瑰油的化学性质稳定，容易挥发，提取方法常用水蒸气蒸馏法。

（3）在制备固定化酵母细胞过程中，溶化好的海藻酸钠溶液要冷却至室温，才能加入已活化的酵母菌，原因是防止高温杀死酵母菌，如果在CaCl2溶液中形成的凝胶珠颜色过浅，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少。

（4）为了筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用选择培养基；实验室进行紫外线消毒时，在照射前，适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以加强消毒效果。