Question

某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌．分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸菌能溶解培养基中的碳酸钙．回答下列问题：

（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用______对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是______．

（2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有______和______．分离纯化时应挑选出______的菌落作为候选菌．

（3）乳酸菌在-20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的______（填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”）．

Answer

无菌水 泡菜滤液中菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落 中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸 利于乳酸菌的识别和分离 在平板上有透明圈 甘油

【解析】

（1）泡菜的制作原理
泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
（2）测定亚硝酸盐含量的原理
在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测对比，可以大致估算出亚硝酸盐的含量。
（3）泡菜的制作

（2）亚硝酸盐含量的测定操作过程

（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释；进行梯度稀释的理由是在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。

（2）在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用是中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸和利于乳酸菌的识别和分离；分离纯化时应挑选出在平板上有透明圈的菌落作为候选菌。

（3）乳酸菌在-20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的甘油，即甘油管藏法。