Question

根据基因工程的有关知识,回答下列问题。

(1)限制酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有：__________和_____________。 

(2)质粒用EcoR Ⅰ切割后产生的片段如下:

AATTC……G

G……CTTAA

为使载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性内切酶切割,该酶必须具有的特点是_______________。 

(3)实际操作中,往往用EcoRⅠ和另一种限制性内切酶同时分别切割质粒和外源DNA分子,其优点在于可防止____。 

(4)按其来源不同,基因工程中所使用的DNA连接酶有两类,即___DNA连接酶和___DNA连接酶。 

(5)基因工程中除质粒外,___和___也可作为载体。

Answer

黏性末端 平末端 切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同 质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化 E·coli T4 动植物病毒 λ噬菌体的衍生物

【解析】

基因工程技术的基本工具：

（1）“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）

①来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。

②功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。

③结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。

（2）“分子缝合针”——DNA连接酶

（3）“分子运输车”——载体

①载体具备的条件：能在受体细胞中复制并稳定保存；具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入；具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。

②最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。

③其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。

（1）限制性内切酶切割DNA分子后产生两种类型的末端，即黏性末端和平末端。

（2）根据题意分析，质粒可以用EcoRⅠ切割，也可以用另一种限制酶切割，说明该酶切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同。

（3）根据题意分析，用不同的限制酶同时分别切割质粒和外源DNA分子,可以防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，进而使得目的基因准确插入质粒。

（4）基因工程使用的DNA连接酶按来源分，可分为E·coli DNA连接酶和T4DNA连接酶。

（5）基因工程常用的运载体有质粒、动植物病毒和λ噬菌体的衍生物。