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图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一...

图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG.请回答下列问题:

(1)基因工程的核心步骤是______________

(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,产生的末端是__末端。

(3)若图1中虚线方框内的碱基对被T﹣A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d.从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有__种不同DNA片段.

(4)在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加__的培养基进行培养.

(5)启动子是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,它是__识别与结合的位点,促进转录的开始.

 

基因表达载体的构建 平 4 抗生素B RNA聚合酶 【解析】 根据题干信息和图形分析可知,外源DNA含有MspⅠ、BamHI、MboI、SmaI 4种限制性核酸内切酶的识别序列,其中限制酶MspⅠ和SmaⅠ的切割位点在目的基因D上;质粒含有MspⅠ、MspI、BamHI、MboI4种限制性核酸内切酶的识别序列,其中BamHI酶的切割位点位于抗生素A的抗性基因上;MboI酶的切割位点位于抗生素B和抗生素A的抗性基因上。 (1)基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤。 (2)SmaⅠ识别和切割位点是CCC↓GGG,因此若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,产生的末端是平末端。 (3)根据题意分析,杂合子的基因型为Dd,其中D基因片段有两个SmaⅠ酶切位点,完全切割后出现三个片段长度分别是534+3=537bp、796-3-3=790bp、658+3=661bp,发生基因突变后的d基因片段只有一个SmaⅠ酶切位点,完全切割后出现两个片段长度分别是1327bp、661bp,所以从杂合子中分离的DNA片段被限制酶SmaⅠ完全切割后形成会四种不同的DNA片段。 (4)用限制酶BamHⅠ切割质粒会破坏抗生素A抗性基因,但不会破坏抗生素B抗性基因,所以导入重组质粒的大肠杆菌能在含有抗生素B的培养基上生存,因此为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加抗生素B的培养基培养。 (5)基因表达载体上的启动子是RNA聚合酶的结合位点。
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考点分析:
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如图所示为科学家利用番茄叶细胞和马铃薯叶细胞杂交培育“番茄—马铃薯”植株的过程,请回答下列问题。

(1)①②过程使用了____________________酶(2种)使植物细胞去壁。

(2)过程⑤属于_______,过程⑥属于_________.

(3)其培养时选用的材料通常是分生组织细胞,因其___________,可实现作物脱毒。

(4)从育种角度来说,图示过程最大的优点是克服了__________________________

 

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科学家利用细胞工程培育“白菜—甘蓝”杂种植株,如图所示,请据图回答下列问题:

(1)图示过程称____________,由AB形成C过程涉及的原理是_________________. C→D与细胞器__________直接相关。

(2)植物原生质体A和B融合可用化学物质_________做诱导剂.

(3)“白菜—甘蓝”杂种植株的食用部分是叶,但叶又易受昆虫危害而影响产量,科学家又利用基因工程培育出带有抗虫基因的“白菜—甘蓝”植株,请你设计实验,检测此植株的抗虫基因是否表达。

①取昆虫(幼虫)放到带有抗虫基因的“白菜—甘蓝”植株甲上,再取等量生活状态基本一致的昆虫(幼虫)放在长势相似的普通“白菜—甘蓝”植株乙上。

②适宜条件下培养一段时间后,分别观察昆虫(幼虫)的生活情况。

③若________,说明甲植株的抗虫基因未得到表达。

 

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下列对动物核移植技术的描述中,错误的是(  )

A. 哺乳动物核移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植

B. 体细胞核移植的过程中可通过显微操作去除卵母细胞中的核

C. 体细胞核移植过程中通常采用MⅡ后期卵母细胞作为受体细胞

D. 通过体细胞核移植方法生产的克隆动物不是对供核动物进行了100%的复制

 

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下列对动物细胞培养的有关叙述正确的是(   )

A. 动物细胞培养的目的是获得大量的细胞分泌蛋白

B. 动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散

C. 细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过程中

D. 动物细胞融合和植物体细胞杂交的原理相同

 

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动物细胞融合技术最重要的用途是(   )

A. 制备单克隆抗体 B. 制备大量动物细胞

C. 制备胚胞 D. 成功进行细胞核移植

 

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