Question

基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G^↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—^↓GATC—。根据图示判断下列操作正确的是(　　)

A. 目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割

B. 目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割

C. 质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割

D. 质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

Answer

D

【解析】

试题根据题意和图示分析可知：由于限制酶Ⅱ能识别限制酶Ⅰ的识别序列，限制酶Ⅰ不能识别限制酶Ⅱ的识别序列．要将目的基因从该DNA链中提取出来，需要在目的基因左右切开，所以要用限制酶Ⅱ；质粒不能用限制酶Ⅱ，如果用该酶的话，质粒就会有两个切口．

【解析】
限制酶I的识别序列和切点是﹣G↓GATCC﹣，限制酶II的识别序列和切点是﹣↓GATC﹣，可知限制酶II能够识别和切割限制酶Ⅰ切割后的黏性末端．

根据题意和图示分析可知：目的基因两端分别是限制酶I的识别序列和切点是﹣G↓GATCC﹣和限制酶II的识别序列和切点是﹣↓GATC﹣，只有用限制酶Ⅱ才能将目的基因切割下来．

质粒有GeneI和GeneⅡ表示两种标记基因，分别有限制酶Ⅱ的识别序列和限制酶Ⅰ的识别序列；如果用限制酶Ⅱ切割，则GeneI 和GeneⅡ都被破坏，造成重组质粒无标记基因；用限制酶Ⅰ切割，则破坏GeneⅡ，保留GeneI，其黏性末端和切割目的基因所在DNA的黏性末端相同，可以连接形成重组DNA．

故选：D．