Question

α₁-抗胰蛋白酶是肝脏产生的一种糖蛋白，缺乏会引起肺气肿。某公司成功培育出转基因羊，这种羊进入泌乳期后，其乳汁中含有人类的α-抗胰蛋白酶，可用于治疗肺气肿。请回答下列问题：

(1)为获取目的基因，需要在肝细胞中提取___________，通过反转录产生cDNA，再通过___________技术进行快速扩增。

(2)将α₁-抗胰蛋白酶基因与乳腺蛋白基因的___________等调控组件重组，构建基因表达载体，然后通过___________技术，导入羊的受精卵中

(3)受精卵通过早期胚胎培养，一般发育到___________阶段通过胚胎移植到受体子宫孕育。为选育出能泌乳的雌羊，移植前需从胚胎的___________部位取样，通过DNA鉴定分析性别。

(4) α₁-抗胰蛋白酶是一种结构较复杂的糖蛋白，上述生产方法与传统的转基因大肠杆菌生产比较，其优势在于______________________。

Answer

mRNA PCR 启动子 显微注射 桑椹胚或囊胚 滋养层 羊细胞有内质网和高尔基体,具备蛋白质加工的能力

【解析】

基因工程的操作步骤：目的基因的获取、构建基因表达载体、把目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

（1）α1-抗胰蛋白酶是肝细胞表达的一种蛋白质，故可以先提取肝细胞的mRNA,在反转录酶的催化作用下合成DNA，再通过PCR进行目的基因的扩增。

（2）构建基因表达载体时，想让目的基因在乳汁中表达，故需要把目的基因与乳腺蛋白的启动子相连，通过显微注射法导入动物的受精卵中。

（3）通常早期胚胎培养至桑椹胚或囊胚阶段可以进行胚胎移植。若要进行性别鉴定，可以取囊胚期滋养层细胞进行DNA鉴定。

（4）该技术选用的受体细胞是真核细胞，相对于转基因大肠杆菌来说，真核细胞具有细胞核和众多的复杂的细胞器，如内质网、高尔基体，可以对蛋白质进行成熟加工，更有优势。