Question

为解决塑料袋(化学成分为聚乙烯)造成的“白色污染”这一问题，某同学试图从土壤中寻找一种能加速塑料袋自然降解过程的目的菌，以下是该同学从土壤中寻找并筛选目的菌的流程，请回答下列问题：

(1)对培养基灭菌常用的方法是______________________。在接种前需要检测使用的培养基是否被污染，方法是______________________。

(2)Ⅰ号培养基属于___________(按功能分)培养基，其作用是使目的菌能“脱颖而出”。如图采用的接种方法为___________。Ⅱ号培养基从物理性质来看，___________(填“能”或“不能”)添加琼脂。

(3)该同学在稀释倍数为10⁴的培养基中测得平板上菌落数的平均值为20.4，则每毫升样品中的菌落数是___________个。(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL)

(4)假设该同学发现培养基上细菌数目过多而连成一片，说出一种可能的原因并提出合理的处理措施。原因：___________；措施：___________。

Answer

高压蒸汽灭菌法 将未接种的培养基在37℃（或适宜温度）恒温箱中倒置培养一段时间（或1～2天），观察是否有菌落生成 选择 稀释涂布平板法 不能 1.02×106 菌液浓度过高（或稀释倍数不够）可以通过增大稀释倍数解决（或原因：培养过程中被杂菌污染） 严格无菌操作程序

【解析】

试题本题主要考查微生物的分离和培养相关知识点，微生物这部分内容是高考试题的一个热点一般体现在对生物工程中的应用，考查的知识点有微生物的无菌操作、微生物的分离以及产品的提取，注意总结。

（1）培养基常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。在接种前需要检测使用的培养基是否被污染，可以将未接种的培养基在37℃（或适宜温度）恒温箱中培养一段时间，观察是否有菌落生成，若有菌落生成，则已经被污染，否则没有被污染。
（2）要筛选能降解聚乙烯塑料的微生物，应选择以聚乙烯塑料为唯一碳源的选择培养基。图Ⅱ号培养基上采用的接种方法为稀释涂布平板法。Ⅱ号培养基为固体培养基，因此不需要加凝固剂--琼脂。
（3）根据题意可知，每克样品中的菌落数=平板上菌落数的平均值÷体积×稀释倍数=20.4÷0.2×104=1.02×106个。
（4）如果培养基上细菌数目过多连成一片，可能的原因是菌液浓度过高或操作过程不是无菌操作，还可能是接种时没有把细菌分散开，采取的措施有：可以通过增大稀释倍数解决（或培养过程中被杂菌污染；严格无菌操作程序。或利用接种针划线时，划下一个区域前没有对接种针灭菌处理；每划一个新的区域都要对接种针进行灭菌处理）。